应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Hind111 与 Not1双酶切请教 急急急！！！
51/1返回列表
查看: 2713  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

madengyu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-05-17 17:06:50
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶倾意

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+3, Good！ 2012-05-18 18:52:47
[1]你要排除是试剂的问题，即你的酶是自己用，还是一堆人在用，要是后者，你还是重新买了，再做吧
[2]大连宝生的是TAKARA的酶么？NOT1 确实有的时候比较难切，你可以换FERMANTAS或者NEB的酶试试
[3]酶切时间有点短，我一般至少切3hr，NOT1很傲娇的。。。
[4]泡电泳的时候，除了marker，上酶切前的质粒，做阴阳性对比，才能看出所有问题。。。
赞一下 回复此楼
自知者智 自胜者勇 自暴者弃 自强者成
9楼2012-05-18 16:49:10
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-18 15:20:43
你的质粒是多大的，酶切后应该是多大的片段？
还有就是用HindIII和NotI双酶切是0.5K+BSA，应该是1ul的K Buffer和2ul的BSA。
赞一下 回复此楼
未来不是梦
2楼2012-05-17 17:56:11
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

madengyu

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
3楼2012-05-17 19:51:03
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-18 15:20:53
我建议你分别用HindIII和NotI做单酶切看看，是哪一个酶的酶切有问题，可能是酶失活，或者酶切条件不合适导致某一个酶的酶切失败。当然，最简单的办法是直接送质粒进行序列分析，就知道是否由序列突变导致酶切位点消失。
赞一下 回复此楼
4楼2012-05-17 22:00:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭