24小时热门版块排行榜    

查看: 2792  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

madengyu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶倾意

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+3, Good! 2012-05-18 18:52:47
[1]你要排除是试剂的问题,即你的酶是自己用,还是一堆人在用,要是后者,你还是重新买了,再做吧
[2]大连宝生的是TAKARA的酶么?NOT1 确实有的时候比较难切,你可以换FERMANTAS或者NEB的酶试试
[3]酶切时间有点短,我一般至少切3hr,NOT1很傲娇的。。。
[4]泡电泳的时候,除了marker,上酶切前的质粒,做阴阳性对比,才能看出所有问题。。。
自知者智 自胜者勇 自暴者弃 自强者成
9楼2012-05-18 16:49:10
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

张宏宇123

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-18 15:20:43
你的质粒是多大的,酶切后应该是多大的片段?
还有就是用HindIII和NotI双酶切是0.5K+BSA,应该是1ul的K Buffer和2ul的BSA。
未来不是梦
2楼2012-05-17 17:56:11
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

madengyu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2012-05-17 19:51:03
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-18 15:20:53
我建议你分别用HindIII和NotI做单酶切看看,是哪一个酶的酶切有问题,可能是酶失活,或者酶切条件不合适导致某一个酶的酶切失败。当然,最简单的办法是直接送质粒进行序列分析,就知道是否由序列突变导致酶切位点消失。
4楼2012-05-17 22:00:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +3 慕寒mio 2026-03-16 3/150 2026-03-17 13:46 by houyaoxu
[考研] 材料与化工专硕调剂 +4 heming3743 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:42 by houyaoxu
[考研] 271求调剂 +12 生如夏花… 2026-03-11 14/700 2026-03-17 10:56 by lovewei0727
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +5 大火山小火山 2026-03-16 7/350 2026-03-17 10:26 by peike
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 一志愿华中师范071000,325求调剂 +6 RuitingC 2026-03-12 6/300 2026-03-16 14:50 by 可淡不可忘
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油!? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 莫xiao 2026-03-10 4/200 2026-03-11 08:06 by 斩魂滴兔子!
信息提示
请填处理意见