[求助] SDS电泳前面很成功，但是到了染色了以后总算是看不清条带？

不知道是染色时间不够长，还是脱色方法不对，染色2小时，过夜脱色，用的0.1%的考马斯亮蓝R-250

大家都是用什么方法染色脱色条带比较好看清晰呢

快染也就是连同染液一起95度加热10分钟染色，95度5分钟脱色换液3-5次，得出的条带比传统方法要好，但是还是不够，而且加热后胶体变脆很容易破，也不知道胶会在细微处变形不

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1楼 2012-05-16 19:59:37

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colorfulmiao

木虫 (小有名气)

应助: 16 (小学生)
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专业: 食品科学基础

【答案】应助回帖

看到好几个你的求助啊~
首先我一般都是用考马斯染色和你的一样还有师姐有一种改良考马斯说是可以显示出浓度较小的蛋白条带你可以试试 11.76mL磷酸 10mL纯水 10g硫酸铵充分溶解后加0.12gG-250 加水至80mL 再加甲醇至100mL 充分溶解棕色瓶保存染色时的步骤是以此染色8-10h 纯水或3%冰醋酸脱色至背景透明
其次本人认为加热会对蛋白条带有一定影响想快速得到结果可以试试想要良好结果还是慢慢染色较好祝顺利

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亦余心之所善兮虽九死其犹未悔

2楼2012-05-23 17:40:30