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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电分析测试 » SDS电泳前面很成功，但是到了染色了以后总算是看不清条带？
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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] SDS电泳前面很成功，但是到了染色了以后总算是看不清条带？

不知道是染色时间不够长，还是脱色方法不对，染色2小时，过夜脱色，用的0.1%的考马斯亮蓝R-250

大家都是用什么方法染色脱色条带比较好看清晰呢

快染也就是连同染液一起95度加热10分钟染色，95度5分钟脱色换液3-5次，得出的条带比传统方法要好，但是还是不够，而且加热后胶体变脆很容易破，也不知道胶会在细微处变形不
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1楼 2012-05-16 19:59:37
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colorfulmiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看到好几个你的求助啊~
首先 我一般都是用考马斯染色 和你的一样 还有师姐有一种改良考马斯 说是可以显示出浓度较小的蛋白条带 你可以试试 11.76mL磷酸 10mL纯水 10g硫酸铵充分溶解后加0.12gG-250 加水至80mL 再加甲醇至100mL 充分溶解 棕色瓶保存 染色时的步骤是以此染色8-10h 纯水或3%冰醋酸脱色至背景透明
其次 本人认为加热会对蛋白条带有一定影响 想快速得到结果可以试试 想要良好结果还是慢慢染色较好 祝顺利
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亦余心之所善兮虽九死其犹未悔
2楼2012-05-23 17:40:30
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