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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] SDS电泳前面很成功,但是到了染色了以后总算是看不清条带?

不知道是染色时间不够长,还是脱色方法不对,染色2小时,过夜脱色,用的0.1%的考马斯亮蓝R-250

大家都是用什么方法染色脱色条带比较好看清晰呢

快染也就是连同染液一起95度加热10分钟染色,95度5分钟脱色换液3-5次,得出的条带比传统方法要好,但是还是不够,而且加热后胶体变脆很容易破,也不知道胶会在细微处变形不
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colorfulmiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看到好几个你的求助啊~
首先 我一般都是用考马斯染色 和你的一样 还有师姐有一种改良考马斯 说是可以显示出浓度较小的蛋白条带 你可以试试 11.76mL磷酸 10mL纯水 10g硫酸铵充分溶解后加0.12gG-250 加水至80mL 再加甲醇至100mL 充分溶解 棕色瓶保存 染色时的步骤是以此染色8-10h 纯水或3%冰醋酸脱色至背景透明
其次 本人认为加热会对蛋白条带有一定影响 想快速得到结果可以试试 想要良好结果还是慢慢染色较好 祝顺利
亦余心之所善兮虽九死其犹未悔
2楼2012-05-23 17:40:30
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