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XUMIN6891金虫 (初入文坛)
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[求助]
求助重叠延伸pcr
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| 各位大侠你们好！我最近在做重叠延伸pcr，我现在遇见几个问题想要咨询一下，我要扩增片段的大小是169bp左右，我设计了4条引物，其中P1和P2引物重叠15bp，P3和P4重叠13bp，P2和P3重叠17bp，然后我采用的是P1，P2引物扩增出A片段，P3，P4扩增出B片段，然后分别回收A,B两个片段，再以A和B即为模板又为引物去扩增出目的片段，但是我现在扩增A和B时，老出现有时候扩出来了，有时候就又没了不稳定，还有又一次我分被回收了A和B片段，但是在扩增目的片段时摸索好多条件还是扩不出来，我用的是降落PCR扩片段，哪位高手知道请指点一下呗！不甚感激！ |
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4楼2012-05-14 20:39:16
2楼2012-05-14 17:22:17
XUMIN6891
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1015.5
- 帖子: 41
- 在线: 19.1小时
- 虫号: 1127506
- 注册: 2010-10-20
- 性别: MM
- 专业: 兽医传染病学
3楼2012-05-14 20:26:54
5楼2012-05-15 19:54:59
