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rebornpro铁虫 (初入文坛)
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[求助]
PCR出现问题，求高人解答
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1、PCR的时候，本来是要加无菌水的，结果误加了PBS，会不会有什么影响？会不会P不出来？ 2、提了几个细菌的基因组之后，准备将其稀释做PCR的模版，一般都是用的无菌水稀释，如果我用的是PBS，并在-20℃保存备用。这样处理之后，还能不能用来做后续的实验（如PCR等）？ |
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孙启亮
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 专家考核, 专家还是很厉害的哦 2012-05-10 13:44:05
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首先你这种情况还真没碰到过。PBS和无酶水的区别是多了几种离子，钾离子，钠离子，氯离子等等。但是我记得这些离子不会对体系中酶的活性产生影响，倒是在对产物跑胶的时候会产生影响。其次，PBS的PH好像是在7.3左右，不知在此PH下会不会对酶活性有影响？！PH的影响可能是主要的。最后，由于你用的PBS应该是普通的，不是无酶的，那么如果有杂质的话可能也会产生影响。事实上PBS中是有杂质的，因为根据经验，我们配的PBS长期存放后会有沉淀。 因为我没遇到这种情况过，所以只能帮你分析，不能给你确定答案，个人建议楼主可以去尝试做一下，看你做的结果之后再做决定，同时我再给你叫个专家过来 @atlanticwi |
rebornpro2楼2012-05-09 23:06:49
atlanticwi
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5楼2012-05-10 08:38:04
hyacinth326
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