24小时热门版块排行榜    

查看: 1745  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ValYu

银虫 (小有名气)

[求助] 关于质粒的PCR

Taq酶是有5'->3'外切活性的,这样的话Taq酶沿着质粒复制一圈回到起点后就会一边外切一边复制,造成缺口的移动,这样的话后面的复制就会混乱,得不到目的片段。我是新手,不太明白,还望大侠指教!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

生命灿烂,精神永恒
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, 应助指数+1, 恩,很清楚了哦 2012-05-03 13:34:11
ValYu: 金币+2, ★★★★★最佳答案, 原来是控制时间啊。还画图,太认真了! 2012-05-03 21:38:50
引用回帖:
5楼: Originally posted by ValYu at 2012-05-02 20:04:01:
第一次复制还是环形的啊,原来的质粒是完整的,新合成的互补链会有一个缺口。就像贪食蛇,一边吃自己的尾巴一边前进……

哦,我明白你的意思了。
不过一般来说,质粒比较大,PCR的延伸时间不足以给聚合酶环形复制的时间,所以第一次循环的产物应该是中间待扩增部分互补,两端有冗余单链的杂交分子;从第二次循环开始,PCR产物就归于正常了。
我画了一个图,不知能否解释清楚:
(黑色部分为待扩增片段,红色部分为两侧冗余片段)。


6楼2012-05-02 22:36:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

cheng_xiao

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-05-01 20:12:42
呵呵,所谓的质粒pcr是指扩增质粒上的一段线性dna,而不是扩增质粒,扩增质粒是用菌体繁殖来实现,就是菌的扩大培养吗,至于质粒扩增的机制还是挺复杂的,有滚环复制等几种,你可以看一下相关书籍,希望有帮助
我努力我奋斗我成功
2楼2012-05-01 16:50:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ValYu

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cheng_xiao at 2012-05-01 16:50:23:
呵呵,所谓的质粒pcr是指扩增质粒上的一段线性dna,而不是扩增质粒,扩增质粒是用菌体繁殖来实现,就是菌的扩大培养吗,至于质粒扩增的机制还是挺复杂的,有滚环复制等几种,你可以看一下相关书籍,希望有帮助

我知道质粒PCR的目的只是拿到其中一段线性序列,这段序列不就是两个引物之间的那一段吗?但是如果缺口移动的话,就得不到你要的那段序列了,你可以画个图看看……
生命灿烂,精神永恒
3楼2012-05-01 17:13:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by ValYu at 2012-05-01 17:13:05:
我知道质粒PCR的目的只是拿到其中一段线性序列,这段序列不就是两个引物之间的那一段吗?但是如果缺口移动的话,就得不到你要的那段序列了,你可以画个图看看……

既然只是一段线性序列,又哪来的“缺口移动”呢?
4楼2012-05-02 19:22:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿天大材料与化工(085600)总分338 +4 蔡大美女 2026-03-13 4/200 2026-03-18 22:47 by walc
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +7 步川酷紫123 2026-03-13 7/350 2026-03-18 17:12 by 尽舜尧1
[考研] 0703化学调剂 +4 pupcoco 2026-03-17 7/350 2026-03-18 12:14 by djl2006
[考研] 环境工程调剂 +8 大可digkids 2026-03-16 8/400 2026-03-18 09:36 by zhukairuo
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 285化工学硕求调剂(081700) +9 柴郡猫_ 2026-03-12 9/450 2026-03-17 10:18 by Sammy2
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 考研调剂 +4 芬达46 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:04 by ruiyingmiao
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。,。,。,。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见