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关于质粒的PCR
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ValYu
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关于质粒的PCR
Taq酶是有5'->3'外切活性的,这样的话Taq酶沿着质粒复制一圈回到起点后就会一边外切一边复制,造成缺口的移动,这样的话后面的复制就会混乱,得不到目的片段。我是新手,不太明白,还望大侠指教!
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2012-05-01 15:06:16
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4楼
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Originally posted by
vir2008
at 2012-05-02 19:22:36:
既然只是一段线性序列,又哪来的“缺口移动”呢?
第一次复制还是环形的啊,原来的质粒是完整的,新合成的互补链会有一个缺口。就像贪食蛇,一边吃自己的尾巴一边前进……
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2012-05-02 20:04:01
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2012-05-01 20:12:42
呵呵,所谓的质粒pcr是指扩增质粒上的一段线性dna,而不是扩增质粒,扩增质粒是用菌体繁殖来实现,就是菌的扩大培养吗,至于质粒扩增的机制还是挺复杂的,有滚环复制等几种,你可以看一下相关书籍,希望有帮助
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2楼
2012-05-01 16:50:23
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2楼
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Originally posted by
cheng_xiao
at 2012-05-01 16:50:23:
呵呵,所谓的质粒pcr是指扩增质粒上的一段线性dna,而不是扩增质粒,扩增质粒是用菌体繁殖来实现,就是菌的扩大培养吗,至于质粒扩增的机制还是挺复杂的,有滚环复制等几种,你可以看一下相关书籍,希望有帮助
我知道质粒PCR的目的只是拿到其中一段线性序列,这段序列不就是两个引物之间的那一段吗?但是如果缺口移动的话,就得不到你要的那段序列了,你可以画个图看看……
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3楼
2012-05-01 17:13:05
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3楼
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ValYu
at 2012-05-01 17:13:05:
我知道质粒PCR的目的只是拿到其中一段线性序列,这段序列不就是两个引物之间的那一段吗?但是如果缺口移动的话,就得不到你要的那段序列了,你可以画个图看看……
既然只是一段线性序列,又哪来的“缺口移动”呢?
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4楼
2012-05-02 19:22:36
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