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液相色谱柱堵了。。。柱压高的不行。
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首先，没用缓冲盐。 怎么就堵了呢。。。 我考虑原因是：1.样品没过滤（但是进的是标准品，用乙腈溶解的，以前也没过滤）；流动相中加了分析纯的冰醋酸，没过滤。今天还加大进样量了。 2.流动相是 甲醇-二氯甲烷 时还好好的。后来加了磷酸水溶液，可能是不相溶了？ 前辈们帮我分析下原因呗。 今天用甲醇冲了一下午，柱压也没降。 明天打算按这个：100% 甲醇、100% 乙腈、 75% 乙腈+25% 异丙醇、100% 异丙醇、 100% 二氯甲烷、 100% 己烷 完整的冲下柱子。 还有什么办法吗，请多指教啊。 |
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先不要这么做，可能的原因就是含醋酸的流动相没有过滤。 建议：将系统分段检查一下，具体如下：将柱子及预柱都取掉跑，看一下柱压变化，此时若柱压基本为0的话，证明原因在后；将柱子取下只用预柱跑，看看柱压，若柱压在适宜范围内，则为柱子问题，否则为预柱问题。 一般不会有太大的问题，先分段排查，要是确实是柱子堵了的话，而且梯度洗脱处理不好的话，再用异丙醇处理，没你说的那么麻烦。 希望对你有帮助 |
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