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20060992

铜虫 (小有名气)

[求助] 液相色谱柱堵了,怎么办

我现在将药物溶解在0.5ml血浆条件下,将血浆经过1ml乙腈沉淀蛋白,离心后过C18小柱,收集洗脱液N2吹干,加溶解试剂后过0.22um滤器进样分析,怎么多程序怎么还能将柱子给堵了呢?
堵后我用100%甲醇冲了,柱压无降,我后又用100%异丙醇冲,柱压还是不降,我也将柱子反冲过。
而且柱压现在比刚开始发现堵了得时候还要高。
难道没有解决的办法了吗?
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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

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20060992(金币+3): 2011-10-25 19:01:42
生物样品堵的话一般是盐类太多了,你用50%甲醇50%水冲洗看看,不行的话提高水的含量
只为活个问心无愧。。
2楼2011-10-24 12:33:41
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lkj2596

金虫 (小有名气)

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20060992(金币+3): 2011-10-25 19:01:50
可以加大水的比例,尽量不要反冲。
多学多看
3楼2011-10-24 14:41:29
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gry660302

木虫 (小有名气)

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20060992(金币+3): 2011-10-25 19:01:55
你先用10%甲醇冲洗柱子,再用100%甲醇洗,加装预柱。
失败是成功之母
4楼2011-10-24 14:58:28
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hemin066

新虫 (小有名气)

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20060992(金币+3): 2011-10-25 19:01:59
做药动一定要加装预柱。如果用了缓冲盐可以先用高比例的水去冲冲柱子,不行再反冲!
5楼2011-10-24 15:08:45
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

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jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-10-24 15:36:37
20060992(金币+3): 2011-10-25 19:02:03
血浆这类东西,最容易堵色谱柱的了。
既然用异丙醇都不行了,那么试试用100%的二氯甲烷(或者100%己烷),使用前注意要用异丙醇过渡,使用后也需要用异丙醇过渡。不然这些溶液会与水乙腈等溶液形成小液滴破坏色谱柱。
守候在风中的宁静。
6楼2011-10-24 15:19:41
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wangxiang88

新虫 (正式写手)

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20060992(金币+3): 2011-10-25 19:02:07
10%甲醇冲洗,比例高的水冲冲
7楼2011-10-24 16:40:57
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杨晓波

银虫 (小有名气)

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20060992(金币+3): 2011-10-25 19:02:10
极性大的话就用5%的水相冲,流速放到0。2~0。3ML/MIN。极性小的话就用四氢呋喃色谱极的,实在不行就反冲下,死马当活马医吧。
愿意和大家共同交流经验,共同学习!
8楼2011-10-24 20:51:36
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zyw2525

新虫 (小有名气)

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20060992(金币+3): 2011-10-25 19:02:14
用55度热水冲洗看看,再分四次注射DMSO,每次100ul。冲洗时间要长。
9楼2011-10-25 12:58:00
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小狼851226

铁虫 (正式写手)

生物产品不晓得,我们再做一个粘度比较大的产品的时候,色谱柱子就老是堵。所以我们就用前处理样品来解决。
10楼2011-10-26 09:04:19
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