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502859345

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

确定是柱子堵了么?  也有可能是管路其他地方如单向阀(岛津),滤白头(安捷伦)。
11楼2011-10-26 09:18:56
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zhanbin823

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 多谢指教! 2011-10-27 22:48:45
异丙醇的粘度很大,必然会柱压很高。建议用四氢呋喃冲洗,流速0.2ml/min。压力降下来以后,用甲醇冲洗。最后用一定比例水和甲醇冲洗。
活到老,学高老。生命不息,奋斗不止。
12楼2011-10-27 18:43:10
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xcy654

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 3Q 2011-10-30 00:45:19
20060992(金币+6): 2011-10-30 10:14:57
乙腈沉淀蛋白离心后没有萃取的干净,要过微孔滤膜或加预柱,最高用95%水相冲洗柱子。
13楼2011-10-29 09:44:00
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sebastianlee

新虫 (初入文坛)

离心的时候至少10000g以上,这样不容易堵
14楼2011-11-10 19:25:05
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

先用55度热水清洗,再用20%-80%的乙腈清洗
dasheng1980
15楼2011-11-10 22:08:12
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lofour

木虫 (小有名气)

不要用极性大的有机溶剂冲洗。堵色谱柱的可能是一些水溶性的蛋白,可以用一些去除蛋白的流动相低流速反冲柱子,我记得好像是20%的乙腈水溶液,你再查一下资料。做生物样品最好加个预柱!
16楼2011-11-11 17:54:28
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

生物样品里有蛋白啊,蛋白发粘,肯定堵啊,过柱之前最好过滤,而且还要加保护柱
17楼2011-11-11 18:23:22
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xxdylj_428

木虫 (正式写手)

你可以尝试把柱子两端堵头卸掉,先用甲醇将柱子泡上3天,在换含有甲醇的娃哈哈水泡几天,我相信可以将柱压降下来
我将在中药复方成分分析、代谢及应答这个领域一直研究下去
18楼2011-11-12 00:33:30
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jljcomeon

新虫 (初入文坛)

做生物样品很容易把柱子堵了,我们就是,很简单,用大比例的水相小流速的冲,你想如果用甲醇冲的话不是更容易将蛋沉淀在柱子里吗?所以我们用的是大概90%的水和10%甲醇0.2的流速冲一晚上,第二天就好了,别着急,一定要加预柱啊!!
19楼2011-11-16 21:49:16
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yugijiang

木虫 (著名写手)

样品一定要处理干净才好的呀,试试升高你的柱温,或者你把柱的进口端筛板拆下来看看情况吧
20楼2012-06-07 17:08:35
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