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20060992

铜虫 (小有名气)

[求助] 液相色谱柱堵了,怎么办

我现在将药物溶解在0.5ml血浆条件下,将血浆经过1ml乙腈沉淀蛋白,离心后过C18小柱,收集洗脱液N2吹干,加溶解试剂后过0.22um滤器进样分析,怎么多程序怎么还能将柱子给堵了呢?
堵后我用100%甲醇冲了,柱压无降,我后又用100%异丙醇冲,柱压还是不降,我也将柱子反冲过。
而且柱压现在比刚开始发现堵了得时候还要高。
难道没有解决的办法了吗?
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zhanbin823

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 多谢指教! 2011-10-27 22:48:45
异丙醇的粘度很大,必然会柱压很高。建议用四氢呋喃冲洗,流速0.2ml/min。压力降下来以后,用甲醇冲洗。最后用一定比例水和甲醇冲洗。
活到老,学高老。生命不息,奋斗不止。
12楼2011-10-27 18:43:10
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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

20060992(金币+3): 2011-10-25 19:01:42
生物样品堵的话一般是盐类太多了,你用50%甲醇50%水冲洗看看,不行的话提高水的含量
只为活个问心无愧。。
2楼2011-10-24 12:33:41
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lkj2596

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

20060992(金币+3): 2011-10-25 19:01:50
可以加大水的比例,尽量不要反冲。
多学多看
3楼2011-10-24 14:41:29
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gry660302

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

20060992(金币+3): 2011-10-25 19:01:55
你先用10%甲醇冲洗柱子,再用100%甲醇洗,加装预柱。
失败是成功之母
4楼2011-10-24 14:58:28
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