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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助细胞内活性氧定量检测实验方法！
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ycl630328

金虫 (小有名气)

[交流] 求助细胞内活性氧定量检测实验方法！

如题：
       本人正在做细胞内活性氧的检测，用了碧云天的活性氧检测试剂盒，说明书上说可以通过酶标板测定荧光值。但具体的操作是怎样的呢？我是用96孔板培养细胞，然后加药刺激，之后清洗，直接在酶标仪上检测，但荧光值只有20左右，而且没有什么大的变化。
       所以想请问各位大侠你们是怎么定量检测细胞内的活性氧呢？参阅了很多文献，都只是说定量检测，实验细节都木有提~
       谢谢啦！！！
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1楼2012-04-26 12:55:10
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chengfangfang

木虫 (正式写手)
★ ★
ycl630328(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-28 10:23:47
酶标仪上测得是吸光值还是荧光值？定量的话要作标准曲线吧。先做一个不同浓度H2O2氧化DCFA荧光值，做一条标准曲线，X轴为h2O2浓度，y轴是荧光值，得出一个方程，在看你样品的荧光值即Y值是多少，对应的X值就是你要的浓度。
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6楼2012-04-28 09:42:35
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chengfangfang

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ycl630328 at 2012-04-28 13:17:10:
酶标板上要测荧光，就是DCF-DA的荧光值，关键是不清楚细胞的处理方式，要提前在6孔板里培养然后转到测荧光的酶标板上还是可以直接在酶标板上直接培养细胞，孵育完后直接检测

碧云天的应该可以96孔板上直接培养细胞，孵育完后直接检测的吧，扣背景。
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9楼2012-04-28 17:51:20
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