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sunnybear

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】细胞实验中蛋白药物的处理方法

我想做一个MTT细胞实验,我用的药物是蛋白质。我想问一下我的蛋白应该怎么进行除菌处理,用滤器会不会对蛋白有影响,蛋白的损失量大吗,滤膜的孔径应该怎么选择,要是不过滤对细胞会不会有影响?初次做细胞实验,请教大家!谢谢回复!
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yukarale

铜虫 (初入文坛)


lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-08-13 18:44:06
sunnybear(金币+1):非常感谢! 2010-08-15 21:36:20
我一般用0.22滤膜过滤,不过滤的话有可能会染菌,但也有不染菌的可能,过滤一下会比较好
2楼2010-08-11 14:23:36
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皖山潜凤

银虫 (小有名气)


lstt09nk(金币+1):欢迎补充~~ 2010-08-13 18:44:31
sunnybear(金币+2):谢谢回复! 2010-08-15 21:36:41
sunnybear(金币+2):谢谢回复! 2010-08-15 21:37:00
引用回帖:
Originally posted by sunnybear at 2010-07-30 18:46:35:
我想做一个MTT细胞实验,我用的药物是蛋白质。我想问一下我的蛋白应该怎么进行除菌处理,用滤器会不会对蛋白有影响,蛋白的损失量大吗,滤膜的孔径应该怎么选择,要是不过滤对细胞会不会有影响?初次做细胞实验, ...

直接过滤。0.22um,要是不放心的话,过滤前先放在-80度冷冻一下,然后过滤。一般过滤一下绝对没问题的,细菌绝对被挡住的
3楼2010-08-13 12:57:30
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henkally

禁虫 (著名写手)

sunnybear(金币+1):谢谢您的建议 2010-08-15 21:37:50
本帖内容被屏蔽

4楼2010-08-13 13:51:23
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梧桐如雪

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5):鼓励新虫交流~~回答的很详细,赞~~ 2010-08-13 18:46:22
sunnybear(金币+2):感谢您分享实验经验 2010-08-15 21:38:22
millipore有好几种膜的一次性滤器,我买的是那种黄色的那种,PVDF膜的,0.22um,是最低蛋白吸附量的。你可以上他们网站看下。比较经济实惠的一个选择,还有个0.11um的,可以除支原体了,可惜比较贵。肯定要损失一点体积,滤器中会有残留,但浓度基本没啥影响。我也是做蛋白药物的活性检测的,MTT做得太多了。祝楼主成功。
5楼2010-08-13 15:11:19
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