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ycl630328

金虫 (小有名气)


[交流] 求助细胞内活性氧定量检测实验方法!

如题:
       本人正在做细胞内活性氧的检测,用了碧云天的活性氧检测试剂盒,说明书上说可以通过酶标板测定荧光值。但具体的操作是怎样的呢?我是用96孔板培养细胞,然后加药刺激,之后清洗,直接在酶标仪上检测,但荧光值只有20左右,而且没有什么大的变化。
       所以想请问各位大侠你们是怎么定量检测细胞内的活性氧呢?参阅了很多文献,都只是说定量检测,实验细节都木有提~
       谢谢啦!!!
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chengfangfang

木虫 (正式写手)


★ ★
ycl630328(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-28 10:23:47
酶标仪上测得是吸光值还是荧光值?定量的话要作标准曲线吧。先做一个不同浓度H2O2氧化DCFA荧光值,做一条标准曲线,X轴为h2O2浓度,y轴是荧光值,得出一个方程,在看你样品的荧光值即Y值是多少,对应的X值就是你要的浓度。
6楼2012-04-28 09:42:35
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ycl630328

金虫 (小有名气)


谢谢,昨天这些帖子我也都看到了,但是没有涉及到测胞内活性氧的具体的操作问题
2楼2012-04-27 18:39:23
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wushuwei1104

银虫 (小有名气)



ycl630328(金币+1): 谢谢参与
可以用流式细胞仪和激光共聚焦!!呵呵
3楼2012-04-27 18:42:45
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ycl630328

金虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-04-27 18:42:45:
可以用流式细胞仪和激光共聚焦!!呵呵

嗯, 是的,但是老板说可以直接测定量的,不是用流式,直接测定荧光
4楼2012-04-27 19:36:22
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