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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助细胞内活性氧定量检测实验方法！
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ycl630328

金虫 (小有名气)

[交流] 求助细胞内活性氧定量检测实验方法！

如题：
       本人正在做细胞内活性氧的检测，用了碧云天的活性氧检测试剂盒，说明书上说可以通过酶标板测定荧光值。但具体的操作是怎样的呢？我是用96孔板培养细胞，然后加药刺激，之后清洗，直接在酶标仪上检测，但荧光值只有20左右，而且没有什么大的变化。
       所以想请问各位大侠你们是怎么定量检测细胞内的活性氧呢？参阅了很多文献，都只是说定量检测，实验细节都木有提~
       谢谢啦！！！
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1楼 2012-04-26 12:55:10
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chengfangfang

木虫 (正式写手)
★ ★
ycl630328(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-04-28 10:23:47
酶标仪上测得是吸光值还是荧光值？定量的话要作标准曲线吧。先做一个不同浓度H2O2氧化DCFA荧光值，做一条标准曲线，X轴为h2O2浓度，y轴是荧光值，得出一个方程，在看你样品的荧光值即Y值是多少，对应的X值就是你要的浓度。
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6楼2012-04-28 09:42:35
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ycl630328

金虫 (小有名气)
谢谢，昨天这些帖子我也都看到了，但是没有涉及到测胞内活性氧的具体的操作问题
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2楼2012-04-27 18:39:23
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wushuwei1104

银虫 (小有名气)
★
ycl630328(金币+1): 谢谢参与
可以用流式细胞仪和激光共聚焦！！呵呵
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3楼2012-04-27 18:42:45
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ycl630328

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wushuwei1104 at 2012-04-27 18:42:45:
可以用流式细胞仪和激光共聚焦！！呵呵

嗯， 是的，但是老板说可以直接测定量的，不是用流式，直接测定荧光
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4楼2012-04-27 19:36:22
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