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a3yangfei

铁虫 (初入文坛)

[求助] SDS电泳条带丢失

求高人帮忙解决一下,为什么我的样品突然间(18Kd)跑不出来了,样品不存在降解问题,分离胶浓度为13%,而且marker14.4Kd的带也不见了。
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qjy_134

铜虫 (小有名气)


2楼2012-04-26 12:57:58
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a3yangfei

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qjy_134 at 2012-04-26 12:57:58:
跑出去了

可是我的溴酚蓝还没有跑穿呢,样品就跑出去了??不解啊!
3楼2012-04-26 14:38:39
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qjy_134

铜虫 (小有名气)


★ ★
西瓜: 金币+2, 看头像应该是专业人士^_^ 2012-04-26 21:52:03
比如你跑8%的胶,20KD以下的蛋白跑出去了,溴酚蓝没跑出,对吧。。。
4楼2012-04-26 15:46:16
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喧嚣的尘埃

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流,欢迎常来哈 2012-04-26 21:52:14
是不是跑出去了,或者可以变一下胶的浓度。
相信自己所相信的
5楼2012-04-26 17:16:28
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a3yangfei

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by qjy_134 at 2012-04-26 15:46:16:
比如你跑8%的胶,20KD以下的蛋白跑出去了,溴酚蓝没跑出,对吧。。。

我理解的是溴酚蓝是前沿,它应该在样品的前面,难道我想错了??
6楼2012-04-26 19:18:31
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a3yangfei

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 喧嚣的尘埃 at 2012-04-26 17:16:28:
是不是跑出去了,或者可以变一下胶的浓度。

我是按照欧洲药典做的,13%的胶,今天做了15%的胶,明天看结果,是不是分离分子量小的蛋白,需要把胶浓度提高一些呢??
7楼2012-04-26 19:20:15
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qjy_134

铜虫 (小有名气)


对的,像你这这种分子量用tricine胶跑会好一些
8楼2012-04-26 19:38:04
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a3yangfei

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by qjy_134 at 2012-04-26 19:38:04:
对的,像你这这种分子量用tricine胶跑会好一些

我们只能按照药典做的,我在溴酚蓝迁移到中间的时候停止电泳会好吗
9楼2012-04-26 19:50:08
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qjy_134

铜虫 (小有名气)


★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励热心应助 2012-04-26 21:52:31
不好,是不是你的30%的胶配了好久了,你啥目的啊?
10楼2012-04-26 19:53:17
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