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caoxiaolei

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 631.3
红花: 1
帖子: 101
在线: 131小时
虫号: 694345
注册: 2009-01-19
专业: 环境污染化学

[求助] DGGE图为啥会这样

做了几次DGGE了，都是如图这样，大家帮忙分析下原因吧，我都快愁死了
条件：30%-60%的梯度，30v 30min预电泳-120v 5h，上样：15ul样品+10ul loading buffer.

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1楼 2012-04-24 10:02:53

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huangk1199

木虫 (正式写手)

应助: 15 (小学生)
金币: 5052
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红花: 3
帖子: 458
在线: 507.3小时
虫号: 785308
注册: 2009-06-02
性别: GG
专业: 环境工程

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-28 15:51:02

胶灌的very good，但是问题有可能在，DNA样上面和染色上面。染色的问题不大，最主要的原因应该是你DNA样品。仔细看图，会发现有band的diffuse，说明DNA很不纯或者有一定的二聚体，能否把琼脂糖电泳图也贴出来看看。另外建议你把以后用sample：6*loading buffer为9:1左右.
先把清洗的DNA的band做出来，再去探求最佳电压和涌动条件