应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 能不能只用一条引物做不对称PCR？
121/1返回列表
查看: 4969  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

真水无香1709

铜虫 (小有名气)

[交流] 能不能只用一条引物做不对称PCR？

rt，有没有直接用一条引物做不对称PCR的？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-04-14 09:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

真水无香1709

铜虫 (小有名气)
有没有虫子知道的？
赞一下 回复此楼
2楼2012-04-14 10:55:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaomuxiaoma

铁虫 (小有名气)
★
真水无香1709(金币+1): 谢谢参与
好像不能吧
回复此楼
3楼2012-04-14 13:52:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

跳跳鱼

木虫 (著名写手)
★
真水无香1709(金币+1): 谢谢参与
没听说过哦
回复此楼
4楼2012-04-14 16:07:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huxx

金虫 (小有名气)
★
真水无香1709(金币+1): 谢谢参与
测序之前即只用一条引物PCR, 不过那不是什么不对称PCR, 只是得到的单链, 而且是 倍数增长, 不是指数.  楼主有什么新想法?
赞一下 回复此楼
5楼2012-04-14 21:09:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaolijunzly

金虫 (小有名气)
★
真水无香1709(金币+1): 谢谢参与
那你的模板得用对称PCR产物啊
赞一下 回复此楼
6楼2012-04-16 22:31:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chibang1220

木虫 (著名写手)
★
真水无香1709(金币+1): 谢谢参与
没试过啊，你可以试试，也不费事
赞一下 回复此楼
8楼2012-04-17 10:03:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

真水无香1709

铜虫 (小有名气)
谢谢各位虫子！我也没做过这个，只是突然有这个疑问。在百度百科里看到“不对称PCR的关键是控制限制性引物的绝对量，需多次摸索优化两条引物的比例.”这么看来还是需要两条引物的，不过为什么说“不对称PCR的关键是控制限制性引物的绝对量，需多次摸索优化两条引物的比例.”？不太明白这句话的意思
赞一下 回复此楼
9楼2012-04-17 15:19:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

open3377

金虫 (小有名气)
★
真水无香1709(金币+1): 谢谢参与
有意思的问题，  PCR是吧模板放大，即使不对称PCR，你也要把模板放大了看吧，一条引物 吧模板翻一倍能看到么？
赞一下 回复此楼
10楼2012-04-17 23:43:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

真水无香1709

铜虫 (小有名气)
谢谢楼上的回复。那是不是可以理解为，当模板的浓度很低的时候，不对称PCR最初的循环是必须用两个引物的，一定循环次数以后，用非限制性引物扩增单链DNA。既然是这样的话，如果样品中模板浓度本身就比较高的时候，是不是就可以直接用一条引物来扩增单链了呢？
赞一下 回复此楼
11楼2012-04-18 09:33:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imyting

至尊木虫 (正式写手)
★
真水无香1709(金币+1): 谢谢参与
个人觉得使用的两条引物量不一样，一条是限制性引物，一条是非限制性引物，限制性引物是用于扩大模板数量的，用于产生双链DNA；而非限制性引物才是用于产生SSDNA的，两者的比例是需要摸索的，因为必须要限制性引物消耗完之后才会产生SSDNA,若是限制性引物太多会造成SSDNA的纯度下降，若是限制性引物太少的话，会造成SSDNA的总量或者是浓度下降，楼主需自行摸索！
赞一下 回复此楼
12楼2012-04-18 10:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
mrna7楼
2012-04-17 07:04   回复  
真水无香1709(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 真水无香1709 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭