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XLJ海阔天空

金虫 (小有名气)


[交流] 做农杆菌转化的请进

各位大侠好,关于抗生素浓度的筛选请教一下:

农杆菌侵染后,经过共培养一段时间后,需要将外植体转移到抑菌培养基上来抑制多余农杆菌的生长,需要对所加抗生素的浓度进行筛选。不知道各位大侠都是用的什么方法来筛选的?
看文献有的是用测OD值的方式来看不同浓度的抗生素的抑菌效果?你是用这种方法吗?这样可行吗?你具体是怎么操作的啊?
还有一种是外植体侵染共培养后,转到含不同浓度抗生素的培养基上来看其抑菌效果,自己感觉好像这个比前一个靠谱。
你使用的什么方法啊?希望和你交流一下,谢谢!
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niushuaiji

金虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
jhu132llh: 金币+3, 感谢新虫积极应助 2012-04-09 18:11:38
培养基中加入头孢霉素可抑制农杆菌的生长,之后再用加有头孢的无菌水冲洗,术语称之为脱毒!
5楼2012-04-08 14:05:39
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neu234

木虫之王 (文学泰斗)



XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
这个不清楚
2楼2012-04-07 20:00:39
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曾经遥远

银虫 (正式写手)



XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
我也想知道
3楼2012-04-08 00:17:16
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wiln1

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
jhu132llh: 金币+2, 鼓励积极交流 2012-04-09 18:11:30
我觉得关键还是:共培养后的外植体清洗,多洗几次,要把农杆菌洗得尽可能干净。我以前第一次做的时候就是没洗干净不管加多少抗生素都不行,只是时间问题,浓度大了可能农杆菌就繁殖得慢点。第二次时我就多洗了几次,结果抗生素浓度低点也不长菌。
4楼2012-04-08 07:29:24
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