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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 做农杆菌转化的请进
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XLJ海阔天空

金虫 (小有名气)

[交流] 做农杆菌转化的请进

各位大侠好，关于抗生素浓度的筛选请教一下：

农杆菌侵染后，经过共培养一段时间后，需要将外植体转移到抑菌培养基上来抑制多余农杆菌的生长，需要对所加抗生素的浓度进行筛选。不知道各位大侠都是用的什么方法来筛选的？
看文献有的是用测OD值的方式来看不同浓度的抗生素的抑菌效果？你是用这种方法吗？这样可行吗？你具体是怎么操作的啊？
还有一种是外植体侵染共培养后，转到含不同浓度抗生素的培养基上来看其抑菌效果，自己感觉好像这个比前一个靠谱。
你使用的什么方法啊？希望和你交流一下，谢谢！
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1楼 2012-04-07 16:22:24
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leannele

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
jhu132llh: 金币+2, 鼓励积极交流 2012-04-11 21:14:47
我们都是转筛选前吹干，在筛选培养基里边加入头孢和目的基因的抗生素。具体的浓度是要筛选的，不同的植物的不同的材料也不一样。我们的实生态和成年态就很大的差别。也可以看看别人发表的文章。
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10楼2012-04-11 11:14:43
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neu234

木虫之王 (文学泰斗)
★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
这个不清楚
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2楼2012-04-07 20:00:39
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曾经遥远

银虫 (正式写手)
★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
我也想知道
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3楼2012-04-08 00:17:16
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wiln1

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
XLJ海阔天空(金币+1): 谢谢参与
jhu132llh: 金币+2, 鼓励积极交流 2012-04-09 18:11:30
我觉得关键还是：共培养后的外植体清洗，多洗几次，要把农杆菌洗得尽可能干净。我以前第一次做的时候就是没洗干净不管加多少抗生素都不行，只是时间问题，浓度大了可能农杆菌就繁殖得慢点。第二次时我就多洗了几次，结果抗生素浓度低点也不长菌。
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4楼2012-04-08 07:29:24
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