24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2846  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

消锦lzhy

新虫 (初入文坛)


[求助] 荧光定量PCR

最近做了一次定量PCR标准曲线,用的染料法,做出来之后的结果很不理想,阴性对照荧光值特别高,求各位大侠帮我看看是污染原因还是引物本身的问题,由于本人是新手,对分子生物学实验相当缺乏经验,现在十分迷茫,不知怎么继续,实验结果如下图:

荧光曲线图



溶解峰



溶解曲线
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

QPCR 问题简答

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

消锦lzhy

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-04 19:14:47:
从图看来可知道你的体系模板加多了。其次是引物有非特异性扩增或者是二聚体。建议对扩增产物跑胶,同时最好先做下普通PCR摸索条件,做荧光PCR摸索条件太浪费钱

非常感谢,其实在这之前用同样的引物优化过PCR反应程序,电泳条带很清晰,而且没有非特异性产物,只是有淡淡的引物二聚体条带,所以才试着做的定量,定量产物跑胶也是同样的情况,不过阴性对照也有条带
5楼2012-04-04 20:36:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 有道理! 2012-04-04 22:25:55
从图看来可知道你的体系模板加多了。其次是引物有非特异性扩增或者是二聚体。建议对扩增产物跑胶,同时最好先做下普通PCR摸索条件,做荧光PCR摸索条件太浪费钱
2楼2012-04-04 19:14:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

消锦lzhy

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-04 19:14:47:
从图看来可知道你的体系模板加多了。其次是引物有非特异性扩增或者是二聚体。建议对扩增产物跑胶,同时最好先做下普通PCR摸索条件,做荧光PCR摸索条件太浪费钱

非常感谢,其实在这之前用同样的引物优化过PCR反应程序,电泳条带很清晰,而且没有非特异性产物,只是有淡淡的引物二聚体条带,所以才试着做的定量,定量产物跑胶也是同样的情况,不过阴性对照也有条带
3楼2012-04-04 20:36:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

消锦lzhy

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 孙启亮 at 2012-04-04 19:14:47:
从图看来可知道你的体系模板加多了。其次是引物有非特异性扩增或者是二聚体。建议对扩增产物跑胶,同时最好先做下普通PCR摸索条件,做荧光PCR摸索条件太浪费钱

非常感谢,其实在这之前用同样的引物优化过PCR反应程序,电泳条带很清晰,而且没有非特异性产物,只是有淡淡的引物二聚体条带,所以才试着做的定量,定量产物跑胶也是同样的情况,不过阴性对照也有条带
4楼2012-04-04 20:36:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工300求调剂 +39 肖开文 2026-04-09 43/2150 2026-04-12 01:30 by 秋豆菜芽
[考研] 280求调剂 +7 兮兮夜夜 2026-04-09 10/500 2026-04-12 00:33 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +11 月@163.com 2026-04-07 13/650 2026-04-11 22:55 by BruceLiu320
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 求调剂 +3 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 14:13 by luhong1990
[考研] 材料工程085601,270求调剂 +30 @ASDF1234 2026-04-08 32/1600 2026-04-11 10:30 by Delta2012
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 一志愿华东师范生物学326分,求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 材料专硕调剂 +16 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 17/850 2026-04-09 21:16 by wutongshun
[考研] 278求调剂 +27 范婷娜 2026-04-07 31/1550 2026-04-09 20:49 by zhouxiaoyu
[考研] 311求调剂 +6 surte 2026-04-08 13/650 2026-04-09 14:00 by surte
[考研] 296求调剂 +3 汪!?! 2026-04-08 3/150 2026-04-08 22:00 by zhouyuwinner
[考研] 电子信息346 +4 zuoshaodian 2026-04-08 4/200 2026-04-08 11:54 by zzucheup
[考研] 281求调剂 +10 椰子蘑菇 2026-04-06 10/500 2026-04-08 11:43 by zzucheup
[考研] 277、学硕,求调剂 数一104, +11 瓶子PZ 2026-04-07 12/600 2026-04-07 23:30 by 一只好果子?
[考研] 22408 318分求调剂 +4 勤奋的小笼包 2026-04-06 6/300 2026-04-07 15:05 by 纸鹤555
[考研] 考研调剂 +3 Wwwwwww哇 2026-04-06 3/150 2026-04-06 20:55 by lbsjt
[考研] 085405软件工程301分求调剂,专硕可跨专业,四六级已过 +3 静静想想 2026-04-05 3/150 2026-04-06 15:23 by nepu_uu
[考研] 第一志愿东南大学物理313,有科研竞赛获奖经历,希望物理复试调剂 +3 马内橙 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:32 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见