| 查看: 3051 | 回复: 12 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
SDS-PAGE样品浓缩的方法
|
||||
SDS-PAGE样品需要浓缩大家用的是什么试剂（例如：TCA）？具体步骤？ [ Last edited by chunqizzm on 2012-3-25 at 23:36 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白质实验技术 |
» 猜你喜欢
0856调剂，是学校就去
已经有9人回复
-
298-一志愿中国农业大学-求调剂
已经有9人回复
-
265求调剂
已经有7人回复
-
求调剂
已经有4人回复
-
学校已经提交到NSFC，还能修改吗？
已经有7人回复
-
材料学硕297已过四六级求调剂推荐
已经有6人回复
-
295复试调剂
已经有7人回复
-
本人考085602 化学工程 专硕
已经有20人回复
-
一志愿中南化学337求调剂
已经有5人回复
-
281求调剂（0805）
已经有23人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- SDS-PAGE蛋白电泳
已经有24人回复
- SDS-PAGE 蛋白胶跑胶问题
已经有27人回复
- 【转】我在SDS-PAGE中所犯的错误，欢迎补充！
已经有33人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳
已经有23人回复
- 原核表达中SDS-PAGE上样量如何确定？
已经有7人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE电泳图 求高人帮忙分析下问题所在 谢谢啦！
已经有19人回复
- 【求助/交流】蛋白样品加热煮过和不煮，SDS-PAGE结果差异显著，这是为何？
已经有20人回复
- 【求助/交流】大神们来看一看 这个胶是怎么回事？？？？
已经有9人回复
- 【求助/交流】SDS-PAGE电泳问题
已经有38人回复
- 【求助/交流】用于SDS-PAGE的菌液样品浓缩问题
已经有4人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
【代人发帖勿站内信】【成都征男友】89年未婚博士漂亮女孩
+1/69
-
坐标广州，男征女，双向奔赴
+1/66
-
武汉高校接受研究生调剂，材料、化学、纺织方向
+2/60
-
青岛高校 研究生招生
+1/49
-
河南工学院诚聘优秀凝聚态物理和电子科学与技术相关专业硕博研究生
+2/38
-
0854电子信息调剂，闽南师大光电芯片研发实验室
+1/35
-
南京理工大学优青团队招聘副教授、博士后、博士、硕士生（化学、催化方向）
+1/31
-
中山大学院士团队微纳器件、脑机接口方向博士招生、博后招聘
+1/19
-
招聘科研助理——储能方向（储能、流体传热、CFD模拟）
+1/19
-
招收专业代码08的学硕！
+1/16
-
【深圳理工大学】院士工作站招聘博士后-电催化和有机电化学
+1/16
-
西南某211招27届博士
+1/16
-
北京某研究院生物化学与分子生物学相关专业申请考核制博士招生（春季）
+1/12
-
南京医科大学-膜蛋白结构与功能课题组-招收2026级博士研究生
+1/10
-
南京林业大学化学工程学院柏惺峰课题组招收2026年申请考核制博士2名
+1/6
-
【第三轮招生】澳科大诚招2026秋全奖博士研究生（纳米医学/生物材料，3月31号截止）
+1/4
-
新加坡国立大学药学系化学生物学课题组招PhD
+1/2
-
南京林业大学木质纤维功能材料国际联合创新中心招收2026级博士生（申请-考核制）
+2/2
-
易度层流质量流量控制器在气液两相循环流动实验气体定量注液中的应用与优势
+1/2
-
南昌航空大学拟招收飞行器设计或计算流体力学研究方向博士生 1名
+1/1
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
chunqizzm: 金币+5 2012-03-27 07:21:19
chunqizzm: 回帖置顶 2012-03-27 07:21:45
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
chunqizzm: 金币+5 2012-03-27 07:21:19
chunqizzm: 回帖置顶 2012-03-27 07:21:45
|
这个是最常用的TCA沉淀方法，一般需要蛋白在5μg/ml以上才能沉下来，也就是说大概还有5μg/ml左右蛋白不能沉淀来，这是理论的，实际收率与样品和操作相关，如果你样品比这浓度还低的话可以试下TCA-DOC沉淀，能沉淀1μg/ml以下的蛋白，然后银染。 TCA-DOC For precipitation of very low protein concentration 1) To one volume of protein solution, add 1/100 vol. of 2% DOC (Na deoxycholate, detergent). 2) Vortex and let sit for 30min at 4C. 3) Add 1/10 of Trichloroacetic acid (TCA) 100% vortex and let sit ON at 4C (preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Maintain in dark bottle at 4C.Be careful, use gloves!!!). 4) Spin 15min 4C in microfuge at maximum speed (15000g). Carefully discharge supernatant and retain the pellet: dry tube by inversion on tissue paper (pellet may be difficult to see). [OPTION: Wash pellet twice with one volume of cold acetone (acetone keep at –20C). Vortex and re-pellet samples 5min at full speed between washes]. 5) Dry samples under vacuum (speed vac) or dry air. For PAGE-SDS, resuspend samples in a minimal volume of sample buffer. (The presence of some TCA can give a yellow colour as a consequence of the acidification of the sample buffer; titrate with 1N NaOH or 1M TrisHCl pH8.5 to obtain the normal blue sample buffer color.) |
chunqizzm9楼2012-03-26 22:04:27
3楼2012-03-25 23:43:09
4楼2012-03-26 09:13:32
5楼2012-03-26 09:16:16
