| 查看: 2810 | 回复: 9 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
dzwd金虫 (小有名气)
|
[求助]
tail-PCR问题，求指导
|
||
| 第一次做有特异条带。同一条件，重复了两次都没有特异条带。是操作问题吗？应该在哪方面改进？高手指点下吧 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有209人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大家有做Tail-PCR的吗？着急！
已经有18人回复
- 求助 土壤基因组 PCR 扩增问题
已经有30人回复
- about tail-pcr
已经有4人回复
- 【求助/交流】TAIL-PCR 问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】PCR引物二聚体问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】qPCR问题求助，请大家帮帮忙，谢谢
已经有5人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR引物跨内含子的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】从RNA到cDNA合成再到克隆PCR的实验技巧和操作细节问题若干，寻求解答
已经有12人回复
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
2楼2012-03-24 19:32:22
3楼2012-03-24 23:38:06
dzwd
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 475.1
- 散金: 20
- 帖子: 131
- 在线: 20.2小时
- 虫号: 681015
- 注册: 2008-12-24
- 性别: GG
- 专业: 作物栽培与耕作学
4楼2012-03-25 08:34:20
dzwd
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 475.1
- 散金: 20
- 帖子: 131
- 在线: 20.2小时
- 虫号: 681015
- 注册: 2008-12-24
- 性别: GG
- 专业: 作物栽培与耕作学
5楼2012-03-25 08:34:54
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, 有条有理~普通PCR重复性是不错，tail-PCR有时候真就看人品。。 2012-03-25 16:13:49
dzwd: 金币+4, ★★★★★最佳答案, 谢谢啊 2012-03-25 21:57:38
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, 有条有理~普通PCR重复性是不错，tail-PCR有时候真就看人品。。 2012-03-25 16:13:49
dzwd: 金币+4, ★★★★★最佳答案, 谢谢啊 2012-03-25 21:57:38
|
嗯....... 不是说没有原因，而是你这种情况，原因可能太多，我们一般认为如果能做出来一次，就说明体系和程序是木有问题的，重复不出来的话，我们会考虑： 1. 引物降解、dNTP降解等，所以会把体系都换一遍 2. 模板也降解，重新提取后再做 3. 机子最近出了问题，换别人的机子试试 4. TAIL-PCR本来一次时间就要3-4个小时、如果你第一轮扩增时间过长，酶能不能抗住也还是问题呢 5. 实在不行，就回去暴吃一顿、蒙头睡一觉，心情好些再继续  PCR本来就是概率时间，就算什么都优化了完美了，也不一定100%重复出来哦 |
6楼2012-03-25 09:12:27
blackrose8089
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 16
- 应助: 100 (初中生)
- 贵宾: 0.11
- 金币: 10638.6
- 散金: 155
- 红花: 30
- 沙发: 6
- 帖子: 3702
- 在线: 790.1小时
- 虫号: 614948
- 注册: 2008-09-28
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
7楼2012-03-25 11:36:23
aoaoshch
木虫 (小有名气)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 2646.2
- 红花: 3
- 帖子: 153
- 在线: 105小时
- 虫号: 800123
- 注册: 2009-06-28
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
8楼2012-03-26 21:45:21
zgb1982
木虫 (正式写手)
- 应助: 46 (小学生)
- 金币: 2895.3
- 红花: 3
- 帖子: 536
- 在线: 227.2小时
- 虫号: 664342
- 注册: 2008-11-29
- 专业: 植物病理学
9楼2012-03-26 22:49:12
caidan1385
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 47.5
- 红花: 1
- 帖子: 37
- 在线: 13.2小时
- 虫号: 1546126
- 注册: 2011-12-21
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
10楼2012-05-23 12:53:30
