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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » tail-PCR问题，求指导
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dzwd

金虫 (小有名气)

[求助] tail-PCR问题，求指导

第一次做有特异条带。同一条件，重复了两次都没有特异条带。是操作问题吗？应该在哪方面改进？高手指点下吧
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1楼 2012-03-24 19:21:26
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caidan1385

新虫 (初入文坛)
请问你做Tail-PCR时，3~4个简并引物是混合在一起与左臂或右臂特异性引物进行pcr反应的还是每个简并引物都要与左臂或右臂特异性引物单独反应啊？求指点下，谢谢了
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10楼2012-05-23 12:53:30
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★
西瓜: 金币+1, 鼓励交流！PCR是很神奇…… 2012-03-25 16:12:20
呵呵呵呵呵呵
同一条件，重复不出来，很正常啊，你需要考虑人品、机子、样品降解等各种因素哦，把所有能换的东西都换成新的，再P一下 P不出来的话，回去睡一觉，休息两三天，默默攒点人品，就会出来了，嘿嘿
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Let God do with it as He wills
2楼2012-03-24 19:32:22
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wocooo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这第一次是指的什么 第一轮扩增？
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3楼2012-03-24 23:38:06
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dzwd

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wocooo at 2012-03-24 23:38:06:
你这第一次是指的什么 第一轮扩增？

不是，是第一次做。第一次完整PCR之后，发现有条带。重复两次后发现没有了。
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4楼2012-03-25 08:34:20
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