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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)

[交流] HPLC,标准品溶液配制 已有9人参与

最近在做异黄酮方面的实验,想配制异黄酮标准品溶液。我用的流动相为0.1%乙酸(水配制)和0.1%乙酸(乙腈配制)。梯度洗脱。我的样品旋蒸后使用80%甲醇溶解的。那我的标准品应该用什么配制?应该用乙腈还是80%甲醇?之前看到有人说,流动相用乙腈的话,最好用乙腈配制。不是很清楚呢。谢谢大家帮忙!
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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by zhrmghgmn at 2012-03-17 11:04:35:
我个人觉得用乙腈配制比较好,因为甲醇和乙腈的紫外吸收是不一样的,用乙腈配制出的峰的峰形应该比甲醇配制的好。

恩,已经峰形应该会好些,但是我回溶的溶剂用的甲醇,不知道会不会有差别?
5楼2012-03-17 16:26:57
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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)

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4楼: Originally posted by laopomao at 2012-03-17 13:03:15:
这个没有严格的要求,但个人认为如果你是打绝对标准曲线的话,应该与回溶溶剂一致吧 因为进样溶剂可能影响锋面积的大小。首先楼主应该确认一下哪个溶剂出峰的峰形比较好,响应比较高,样品回溶效果好。如果没有太 ...

绝对标准曲线是个什么概念?不好意思,刚接触,不是很明白。还有,你说的确认哪个溶剂出峰好,是指用不同的溶剂回溶还是配置不同的标准液?谢啦
6楼2012-03-17 16:29:22
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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)

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3楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2012-03-17 12:50:57:
尽可能的选择用流动相去溶解样品,要不然色谱图上会出现其他吸收峰甚至是倒峰

如果是这样的话,我回溶用的甲醇。预实验的时候,前几分钟会出现倒峰,难道是因为这个原因?谢啦
7楼2012-03-17 16:30:42
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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)

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9楼: Originally posted by fisherme at 2012-03-17 17:36:45:
理论上是要用流动相配制样品以及标准品,但是你的样品用的甲醇溶解,为什么不能用流动相溶解?做标曲的话必须要流动相配制的

看了好多文献,没有用已经溶解样品的,具体的原因我不是很清楚。但是,标曲为什么一定要用流动相配制?我看文献,也有的是用甲醇溶解,但是流动相是乙腈的呢。
11楼2012-03-19 17:46:37
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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)

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10楼: Originally posted by lxq0226 at 2012-03-19 17:29:01:
你标准品是用来做样品的对照的,当然要和样品一直啦

我也是这么想的,但是很多人说会有溶剂效应。我也不知道这个溶剂效应具体是怎么回事,纠结了。。。
12楼2012-03-19 17:47:41
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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)

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8楼: Originally posted by 30716875 at 2012-03-17 17:20:28:
用流动相配最好
不会有溶剂效应

溶剂效应到底是怎么回事呢?能不能详细说下,谢啦
13楼2012-03-19 17:48:22
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