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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC，标准品溶液配制
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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)

[交流] HPLC，标准品溶液配制 已有9人参与

最近在做异黄酮方面的实验，想配制异黄酮标准品溶液。我用的流动相为0.1%乙酸（水配制）和0.1%乙酸（乙腈配制）。梯度洗脱。我的样品旋蒸后使用80%甲醇溶解的。那我的标准品应该用什么配制？应该用乙腈还是80%甲醇？之前看到有人说，流动相用乙腈的话，最好用乙腈配制。不是很清楚呢。谢谢大家帮忙！
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1楼 2012-03-17 10:27:11
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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2012-03-17 12:50:57:
尽可能的选择用流动相去溶解样品，要不然色谱图上会出现其他吸收峰甚至是倒峰

如果是这样的话，我回溶用的甲醇。预实验的时候，前几分钟会出现倒峰，难道是因为这个原因？谢啦
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7楼2012-03-17 16:30:42
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zhrmghgmn

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
soundhorizo: 金币+1, 欢迎常来~ ^^ 2012-03-17 17:18:19
我个人觉得用乙腈配制比较好，因为甲醇和乙腈的紫外吸收是不一样的，用乙腈配制出的峰的峰形应该比甲醇配制的好。
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2楼2012-03-17 11:04:35
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
尽可能的选择用流动相去溶解样品，要不然色谱图上会出现其他吸收峰甚至是倒峰
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我那么努力，就是为了在更高的层次遇见你！
3楼2012-03-17 12:50:57
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laopomao

禁虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
soundhorizo: 金币+1, 感谢应助，欢迎常来~ ^^ 2012-03-17 17:18:47
本帖内容被屏蔽
4楼2012-03-17 13:03:15
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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhrmghgmn at 2012-03-17 11:04:35:
我个人觉得用乙腈配制比较好，因为甲醇和乙腈的紫外吸收是不一样的，用乙腈配制出的峰的峰形应该比甲醇配制的好。

恩，已经峰形应该会好些，但是我回溶的溶剂用的甲醇，不知道会不会有差别？
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5楼2012-03-17 16:26:57
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xiaoyan1028

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by laopomao at 2012-03-17 13:03:15:
这个没有严格的要求，但个人认为如果你是打绝对标准曲线的话，应该与回溶溶剂一致吧 因为进样溶剂可能影响锋面积的大小。首先楼主应该确认一下哪个溶剂出峰的峰形比较好，响应比较高，样品回溶效果好。如果没有太 ...

绝对标准曲线是个什么概念？不好意思，刚接触，不是很明白。还有，你说的确认哪个溶剂出峰好，是指用不同的溶剂回溶还是配置不同的标准液？谢啦
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6楼2012-03-17 16:29:22
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30716875

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用流动相配最好
不会有溶剂效应
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8楼2012-03-17 17:20:28
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fisherme

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
理论上是要用流动相配制样品以及标准品，但是你的样品用的甲醇溶解，为什么不能用流动相溶解？做标曲的话必须要流动相配制的
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9楼2012-03-17 17:36:45
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lxq0226

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你标准品是用来做样品的对照的，当然要和样品一直啦
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10楼2012-03-19 17:29:01
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