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【求助】样品和标准品溶液的不同对结果有影响吗?
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gielcheen
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[交流]
【求助】样品和标准品溶液的不同对结果有影响吗?
我用C18色谱柱,乙腈和水作为流动相,梯度洗脱,目标物质是一种多肽。我想问一下我的样品溶解在乙腈和水的混合液中,标准品(即做标准曲线的纯品)溶解在PBS中,这样通过标准曲线算出的样品中多肽浓度有影响吗?
其实也就是问样品与标准品溶解在不同体系中,对结果有没有影响?
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2011-03-24 13:48:23
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pplover(金币+2): 鼓励新虫交流1...说得在理. 2011-03-24 20:33:07
gielcheen(金币+1): 2011-03-25 15:53:42
引用回帖:
Originally posted by
gielcheen
at 2011-03-24 13:48:23:
我用C18色谱柱,乙腈和水作为流动相,梯度洗脱,目标物质是一种多肽。我想问一下我的样品溶解在乙腈和水的混合液中,标准品(即做标准曲线的纯品)溶解在PBS中,这样通过标准曲线算出的样品中多肽浓度有影响吗?
...
应该是有影响的,色谱是根据一种溶质在固定相和流动相的分配比不同而分离的,现在你的溶质就不同,标准品就起不了做标准的作用.同时不同的溶剂对分离的效果也是有影响的。
[
Last edited by 风去无影 on 2011-3-24 at 14:54
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同意以上说法
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影响应该很小的,溶剂很少,最主要的还是流动相
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2011-03-24 19:05:11
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风去无影
at 2011-03-24 14:52:33:
应该是有影响的,色谱是根据一种溶质在固定相和流动相的分配比不同而分离的,现在你的溶质就不同,标准品就起不了做标准的作用.同时不同的溶剂对分离的效果也是有影响的。
[
Last edited by 风去无影 on ...
我的溶质是一样的,只是溶解在了不同的体系。例如,我做标准曲线时,把我的多肽溶解在水中,而我测量的样品多肽溶解在PBS中,我就想知道这样会不会对测量结果造成影响。
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gielcheen
at 2011-03-25 15:52:53:
我的溶质是一样的,只是溶解在了不同的体系。例如,我做标准曲线时,把我的多肽溶解在水中,而我测量的样品多肽溶解在PBS中,我就想知道这样会不会对测量结果造成影响。
不好意思,是我打错字了,应该是溶剂不同,而同一种溶质在两种不同的溶剂中的分配比肯定是不一样的呀,应该是有影响的
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2011-03-25 20:23:55
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不好意思,是我打错字了,应该是溶剂不同,而同一种溶质在两种不同的溶剂中的分配比肯定是不一样的呀,应该是有影响的
但是,c18反相柱的原理是根据流动相的疏水性的改变而对多肽进行分离的,跟溶剂好像没有太大影响,我不知道你做过相关实验没有,我是嫌太麻烦,所以就没有做。只是理论这么推断。
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2011-03-25 22:03:43
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gielcheen
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但是,c18反相柱的原理是根据流动相的疏水性的改变而对多肽进行分离的,跟溶剂好像没有太大影响,我不知道你做过相关实验没有,我是嫌太麻烦,所以就没有做。只是理论这么推断。
我也没有做过,但是我说的是色谱的基本原理,疏水性也是根据“相似相容”的原则的
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2011-03-26 15:06:24
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