[交流] 【求助】样品和标准品溶液的不同对结果有影响吗？

Originally posted by gielcheen at 2011-03-24 13:48:23:
我用C18色谱柱，乙腈和水作为流动相，梯度洗脱，目标物质是一种多肽。我想问一下我的样品溶解在乙腈和水的混合液中，标准品（即做标准曲线的纯品）溶解在PBS中，这样通过标准曲线算出的样品中多肽浓度有影响吗？
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Originally posted by 风去无影 at 2011-03-24 14:52:33:
应该是有影响的，色谱是根据一种溶质在固定相和流动相的分配比不同而分离的，现在你的溶质就不同，标准品就起不了做标准的作用.同时不同的溶剂对分离的效果也是有影响的。

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Originally posted by gielcheen at 2011-03-25 15:52:53:
我的溶质是一样的，只是溶解在了不同的体系。例如，我做标准曲线时，把我的多肽溶解在水中，而我测量的样品多肽溶解在PBS中，我就想知道这样会不会对测量结果造成影响。

Originally posted by 风去无影 at 2011-03-25 20:23:55:
不好意思，是我打错字了，应该是溶剂不同，而同一种溶质在两种不同的溶剂中的分配比肯定是不一样的呀，应该是有影响的

Originally posted by gielcheen at 2011-03-25 22:03:43:
但是，c18反相柱的原理是根据流动相的疏水性的改变而对多肽进行分离的，跟溶剂好像没有太大影响，我不知道你做过相关实验没有，我是嫌太麻烦，所以就没有做。只是理论这么推断。