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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】样品和标准品溶液的不同对结果有影响吗？
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gielcheen

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】样品和标准品溶液的不同对结果有影响吗？

我用C18色谱柱，乙腈和水作为流动相，梯度洗脱，目标物质是一种多肽。我想问一下我的样品溶解在乙腈和水的混合液中，标准品（即做标准曲线的纯品）溶解在PBS中，这样通过标准曲线算出的样品中多肽浓度有影响吗？
其实也就是问样品与标准品溶解在不同体系中，对结果有没有影响？
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1楼 2011-03-24 13:48:23
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风去无影

银虫 (小有名气)
★ ★
pplover(金币+2): 鼓励新虫交流1...说得在理. 2011-03-24 20:33:07
gielcheen(金币+1): 2011-03-25 15:53:42
引用回帖:
Originally posted by gielcheen at 2011-03-24 13:48:23:
我用C18色谱柱，乙腈和水作为流动相，梯度洗脱，目标物质是一种多肽。我想问一下我的样品溶解在乙腈和水的混合液中，标准品（即做标准曲线的纯品）溶解在PBS中，这样通过标准曲线算出的样品中多肽浓度有影响吗？
...

应该是有影响的，色谱是根据一种溶质在固定相和流动相的分配比不同而分离的，现在你的溶质就不同，标准品就起不了做标准的作用.同时不同的溶剂对分离的效果也是有影响的。

[ Last edited by 风去无影 on 2011-3-24 at 14:54 ]
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2楼2011-03-24 14:52:33
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shesui

金虫 (正式写手)
同意以上说法
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3楼2011-03-24 16:56:00
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lanpishu23

木虫 (小有名气)
影响应该很小的，溶剂很少，最主要的还是流动相
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4楼2011-03-24 19:05:11
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gielcheen

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 风去无影 at 2011-03-24 14:52:33:
应该是有影响的，色谱是根据一种溶质在固定相和流动相的分配比不同而分离的，现在你的溶质就不同，标准品就起不了做标准的作用.同时不同的溶剂对分离的效果也是有影响的。

[ Last edited by 风去无影 on  ...

我的溶质是一样的，只是溶解在了不同的体系。例如，我做标准曲线时，把我的多肽溶解在水中，而我测量的样品多肽溶解在PBS中，我就想知道这样会不会对测量结果造成影响。
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5楼2011-03-25 15:52:53
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风去无影

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gielcheen at 2011-03-25 15:52:53:
我的溶质是一样的，只是溶解在了不同的体系。例如，我做标准曲线时，把我的多肽溶解在水中，而我测量的样品多肽溶解在PBS中，我就想知道这样会不会对测量结果造成影响。

不好意思，是我打错字了，应该是溶剂不同，而同一种溶质在两种不同的溶剂中的分配比肯定是不一样的呀，应该是有影响的
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6楼2011-03-25 20:23:55
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gielcheen

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 风去无影 at 2011-03-25 20:23:55:
不好意思，是我打错字了，应该是溶剂不同，而同一种溶质在两种不同的溶剂中的分配比肯定是不一样的呀，应该是有影响的

但是，c18反相柱的原理是根据流动相的疏水性的改变而对多肽进行分离的，跟溶剂好像没有太大影响，我不知道你做过相关实验没有，我是嫌太麻烦，所以就没有做。只是理论这么推断。
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7楼2011-03-25 22:03:43
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风去无影

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gielcheen at 2011-03-25 22:03:43:
但是，c18反相柱的原理是根据流动相的疏水性的改变而对多肽进行分离的，跟溶剂好像没有太大影响，我不知道你做过相关实验没有，我是嫌太麻烦，所以就没有做。只是理论这么推断。

我也没有做过，但是我说的是色谱的基本原理，疏水性也是根据“相似相容”的原则的
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8楼2011-03-26 15:06:24
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