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flyaway7585

金虫 (正式写手)

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[交流] 肝脏RNA提取

提取肝脏（小鼠）的RNA时，大家有没有最后（异丙醇沉淀）出现沉淀太多，有很多蛋白？这种情况该怎么改进？

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1楼 2012-03-11 00:34:05

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sxxyxh

新虫 (初入文坛)

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★ ★ ★ ★
flyaway7585(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流问题 2012-10-26 08:05:06

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http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4736603
http://www.dxy.cn/bbs/topic/2358 ... 2%E4%B8%99%E9%86%87

我昨天提RNA也遇到这个问题，并且我们实验室之前也有人遇到这个问题。

目前我的推测是：匀浆时组织加多了。原因：
1.我之前提的脾脏和头肾组织RNA，效果非常好；偏偏提肝脏出这样的问题，我们实验室人出这问题也是在肝脏组织。后来我发现，TaKaRa的RNAiso Plus提RNA，每g脑组织可提取1500μg RNA，每g烟草叶片可提取1000μg RNA，而每g肝脏组织可提高达5000μg的RNA。
2.测浓度时，OD280值并不大，且跑胶时胶孔未见蛋白残留，说明那一大坨白色物质不太可能是蛋白。

另一个可能的原因是：乙醇未除干净，因为OD230较大，而盐离子浓度影响RNA的溶解度。

另外我想问问楼主，加Trizol后匀浆离心后，上层是否漂有白白的颗粒状东西？