24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1768  |  回复: 14

amy_fangming

铜虫 (初入文坛)

[求助] 3’RACE扩增技术

现在在做3‘RACE扩增目的片段,引物也换了三次了,还是没扩出所需的目的片段而扩出了别的基因,到底是什么原因?请大家帮忙分析下,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

跳跳鱼

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
特异性不够吧    既然扩出来说明3·端通用引物没问题   上游引物特异性不好

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

快乐奋斗,创造所有。
2楼2012-03-07 14:53:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amy_fangming

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
: Originally posted by 跳跳鱼 at 2012-03-07 14:53:40:
特异性不够吧    既然扩出来说明3·端通用引物没问题   上游引物特异性不好

您好!谢谢您的帮助,可是怎么可以使得它的引物特异性强呢?哪些因素会影响目的片段的扩增?
3楼2012-03-07 15:14:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zoeye

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是用KIT做的吗 我看我们实验室有人用TAKARA 3’RACE的KIT做的
用OLIGO的那个随机引物就可以做出来
4楼2012-03-07 21:49:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
5楼2012-03-07 21:49:44
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

amy_fangming

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by zoeye at 2012-03-07 21:49:14:
你是用KIT做的吗 我看我们实验室有人用TAKARA 3’RACE的KIT做的
用OLIGO的那个随机引物就可以做出来

额,没有吧,只是用了takara公司的PCR所需的buffer,dNTP TAq类的用于PCR的反应液,您所说的OLIGO的那个随机引物我不太懂呢,可以具体说下吗?我很想知道,O(∩_∩)O谢谢
6楼2012-03-09 12:07:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zoeye

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by amy_fangming at 2012-03-09 12:07:57:
额,没有吧,只是用了takara公司的PCR所需的buffer,dNTP TAq类的用于PCR的反应液,您所说的OLIGO的那个随机引物我不太懂呢,可以具体说下吗?我很想知道,O(∩_∩)O谢谢

你去TAKARA的官网找 有做3‘race的KIT的 不贵 引物什么的里面都有
具体信息你去官网查吧
7楼2012-03-09 12:46:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amy_fangming

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by zoeye at 2012-03-09 12:46:39:
你去TAKARA的官网找 有做3‘race的KIT的 不贵 引物什么的里面都有
具体信息你去官网查吧

嗯,好的,谢谢您了
8楼2012-03-09 14:41:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amy_fangming

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 大-木-虫 at 2012-03-07 21:49:44:
我也遇到这个问题了 反转录内参检测没问题 就是扩增出比我预测的小的多的产物

你扩的那个片段大小可以预测的啦,我是不能预测大小的,有点郁闷啦
9楼2012-03-09 14:43:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amy_fangming

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by zoeye at 2012-03-09 12:46:39:
你去TAKARA的官网找 有做3‘race的KIT的 不贵 引物什么的里面都有
具体信息你去官网查吧

您好,你所说的做3‘race的KIT是关于PCR方面的还是关于RNA反转录方面的,我在商品目录和官网都没找到关于PCR方面的哇?谢谢
10楼2012-03-09 15:08:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 amy_fangming 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂,一志愿厦门大学,生物与医药,总分272,本科211 +3 Electron1cc 2026-04-01 4/200 2026-04-05 20:24 by lys0704
[考研] 材料0856 英一数二 323 求调剂 +14 袁sy 2026-04-01 14/700 2026-04-05 18:18 by cql1109
[考研] 工科08专硕机械275求调剂 +3 AaAa7420 2026-04-02 3/150 2026-04-05 13:26 by jp9609
[考研] 生物工程求调剂 +6 喜欢还是不甘心 2026-04-05 6/300 2026-04-05 10:28 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +4 晟功? 2026-04-03 4/200 2026-04-04 21:58 by hemengdong
[考研] 277工科求调剂 +7 1915668 2026-04-04 7/350 2026-04-04 17:21 by 啊俊!
[考研] 考研调剂 +5 小sun要好运 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:43 by 啵啵啵0119
[考研] 322求调剂 +4 FZAC123 2026-04-03 4/200 2026-04-03 20:55 by zhq0425
[考研] 335求调剂 +7 沈清璃 2026-04-03 7/350 2026-04-03 18:55 by lijunpoly
[考研] 326分求调剂 +3 于是乎呢 2026-04-01 5/250 2026-04-03 14:23 by 于是乎呢
[考研] 专硕085601求调剂 +7 suyifei 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:00 by 欣喜777
[考研] 0856材料与化工调剂,339 +14 10213207 2026-03-31 14/700 2026-04-02 21:01 by 1104338198
[考研] 能源动力 调剂 +3 不破不立0 2026-04-02 3/150 2026-04-02 12:46 by ffffjjjj
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-04-01 11/550 2026-04-02 11:31 by lnilvy
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿北京科技,085601总分305求调剂 +9 半生瓜! 2026-04-01 11/550 2026-04-02 08:28 by Wang200018
[考研] 318求调剂 +8 七忆77 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:37 by Jaylen.
[考研] 0710生物学求调剂! +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料357 +4 麦恩莉. 2026-03-30 4/200 2026-03-31 14:35 by 记事本2026
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见