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wushuwei1104

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[求助] 做RACE对RNA质量的要求

最近在做RACE ，想向各位大侠请教个问题：3‘RACE或是5’RACE是不是对RNA的质量要求特别高？如果质量不高的话会有什么结果，是扩不出目的条带？或者是扩初条带但非特异扩增的几率大？最近做的3‘RACE，出来条带感觉是非特异性扩增，不知是引物设计的不对，还是提取的RNA质量不高？

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勤能补拙

1楼 2012-05-20 18:44:51

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wcwluwei

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小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-05-21 13:37:03

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2楼2012-05-20 20:43:24

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wushuwei1104

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引用回帖:

2楼: Originally posted by wcwluwei at 2012-05-20 20:43:24:
做RACE的RNA质量要求非常高，当然这是做好RACE必须的，如果质量好的话，才能确保你要的序列在里面而且结构完整，另外，OD的比值应该在标准的范围内，一般都要在2.0左右，浓度2000以上，这样如果操作上没什么问题的 ...

哦，感谢了这位仁兄。我们一直都用宝生物的3‘RACE试剂盒，话说用的是3'RACE adaptor。我这个可能还真是RNA质量的问题。再试试吧！谢谢了！！