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li-spring

木虫 (著名写手)


[交流] 表达质粒测序

构建好的Pet30载体,都做了PCR验证,目的基因条带都有,但测序结果那个片段是载体上的序列,不知为什么?求解
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imyting

至尊木虫 (正式写手)


★ ★
li-spring(金币+1):谢谢参与
小丹木木(金币+1): 鼓励交流 2012-03-05 11:00:07
1.如上述,可再酶切验证一下;
2.测序有特定的载体引物,你应该看两个酶切位点之间的序列,两端的序列肯定是载体上的,你可以把目的序列与测得的序列比对下;
3.你也可以把你的两端引物给测序公司,让他用你的引物测;
4.也有可能是你在培养测序的菌时,被空载的菌体污染,空载的菌体与工程菌相比是有生长优势的。
7楼2012-03-04 21:41:36
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li-spring(金币+1):谢谢参与
挑的菌是假阳性。
2楼2012-03-04 19:59:04
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li-spring

木虫 (著名写手)


引用回帖:
: Originally posted by lxj341401 at 2012-03-04 19:59:04:
挑的菌是假阳性。

假阳性 但做PCR验证又有条带呢?
3楼2012-03-04 20:19:31
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li-spring

木虫 (著名写手)


但提取的质粒作PCR验证还是有目的条带啊
4楼2012-03-04 20:20:02
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