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li-spring

木虫 (著名写手)

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[交流] 表达质粒测序

构建好的Pet30载体，都做了PCR验证，目的基因条带都有，但测序结果那个片段是载体上的序列，不知为什么？求解

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1楼 2012-03-04 15:59:39

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imyting

至尊木虫 (正式写手)

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★ ★
li-spring(金币+1):谢谢参与
小丹木木(金币+1): 鼓励交流 2012-03-05 11:00:07

1.如上述，可再酶切验证一下；
2.测序有特定的载体引物，你应该看两个酶切位点之间的序列，两端的序列肯定是载体上的，你可以把目的序列与测得的序列比对下；
3.你也可以把你的两端引物给测序公司，让他用你的引物测；
4.也有可能是你在培养测序的菌时，被空载的菌体污染，空载的菌体与工程菌相比是有生长优势的。