应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 表达质粒测序
91/1返回列表
查看: 1037  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

li-spring

木虫 (著名写手)

[交流] 表达质粒测序

构建好的Pet30载体，都做了PCR验证，目的基因条带都有，但测序结果那个片段是载体上的序列，不知为什么？求解
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-03-04 15:59:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
li-spring(金币+1):谢谢参与
挑的菌是假阳性。
回复此楼
2楼2012-03-04 19:59:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li-spring

木虫 (著名写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-03-04 19:59:04:
挑的菌是假阳性。

假阳性 但做PCR验证又有条带呢？
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-04 20:19:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

li-spring

木虫 (著名写手)
但提取的质粒作PCR验证还是有目的条带啊
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-04 20:20:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuijy

银虫 (小有名气)
★
li-spring(金币+1):谢谢参与
可以先做一下双酶切，跑胶，然后再选择pET上的特定启动子开始测序。
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-04 20:20:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dxzhaomiao

金虫 (正式写手)
★
li-spring(金币+1):谢谢参与
酶切验证一下。有时候PCR很难讲清怎么回事
赞一下 回复此楼
6楼2012-03-04 21:27:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imyting

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
li-spring(金币+1):谢谢参与
小丹木木(金币+1): 鼓励交流 2012-03-05 11:00:07
1.如上述，可再酶切验证一下；
2.测序有特定的载体引物，你应该看两个酶切位点之间的序列，两端的序列肯定是载体上的，你可以把目的序列与测得的序列比对下；
3.你也可以把你的两端引物给测序公司，让他用你的引物测；
4.也有可能是你在培养测序的菌时，被空载的菌体污染，空载的菌体与工程菌相比是有生长优势的。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2012-03-04 21:41:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bonbonzd

木虫 (小有名气)
★
li-spring(金币+1):谢谢参与
不知楼主用什么引物做的PCR,可以用载体上引物做一下PCR，同样用你目的基因的引物做一下PCR，电泳，如果两次结果都有目的条带，则应该可说明是阳性了。不知对楼主有没有帮助
赞一下 回复此楼
8楼2012-03-04 22:55:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huguangdong

至尊木虫 (职业作家)
★
li-spring(金币+1):谢谢参与
PCR验证本来就不准确，最好是用酶切鉴定。
赞一下 回复此楼
9楼2012-03-06 14:31:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 li-spring 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 YXM1FDCSE8Bn 2026-10-31 6/300 2026-11-02 09:36 by dcc2yOIRGGTT
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 6/300 2026-11-02 09:31 by dcc2yOIRGGTT
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 7/350 2026-11-02 09:29 by dcc2yOIRGGTT
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-02 06:13 by xzcv0Tehd8lQ
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 9/450 2026-11-02 06:13 by xzcv0Tehd8lQ
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 9/450 2026-11-02 05:54 by xzcv0Tehd8lQ
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 21/1050 2026-11-02 05:41 by xzcv0Tehd8lQ
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 9/450 2026-11-02 03:26 by xzcv0Tehd8lQ
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +6 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 9/450 2026-11-02 03:00 by xzcv0Tehd8lQ
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 6/300 2026-11-01 22:11 by xzcv0Tehd8lQ
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 7/350 2026-11-01 22:01 by xzcv0Tehd8lQ
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 8/400 2026-11-01 21:35 by xzcv0Tehd8lQ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 11/550 2026-11-01 21:35 by xzcv0Tehd8lQ
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 6/300 2026-11-01 19:50 by xzcv0Tehd8lQ
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 13/650 2026-11-01 16:48 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 5/250 2026-11-01 12:51 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 10/500 2026-11-01 12:27 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 16/800 2026-11-01 12:14 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 18/900 2026-11-01 12:11 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请 +3 小小阿光 2026-10-27 3/150 2026-10-29 23:56 by 起风了的快乐
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭