| 查看: 3429 | 回复: 10 | ||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||
njyang2006金虫 (正式写手)
|
[求助]
请问用Vector NTI如何实现在pET28a中加入目的基因片段的谱图绘制。
|
|
|
本人选用上游Nde I，下游Xho I酶切位点。 绘制谱图时发现pET28a的谱图中启动子和终止子的顺序刚好与实际的方向相反，请问这种情况下，如何把目的基因片段添加进去？  |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
寒亦乔51» 猜你喜欢
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有3人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有4人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
-
AI论文写作工具：是科研加速器还是学术作弊器？
已经有3人回复
-
孩子确诊有中度注意力缺陷
已经有6人回复
-
2026博士申请-功能高分子，水凝胶方向
已经有6人回复
-
论文投稿，期刊推荐
已经有4人回复
-
硕士和导师闹得不愉快
已经有13人回复
-
请问2026国家基金面上项目会启动申2停1吗
已经有5人回复
-
同一篇文章，用不同账号投稿对编辑决定是否送审有没有影响？
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
请教一下两种光谱的区别和一个实验的可行性
已经有3人回复- 【教程】岛津LC-20AT型高效液相色谱仪图文操作手册
已经有260人回复
- 如何获得一个酶的基因
已经有5人回复
- 反转录之后PCR扩增片段问题的请教，急急急
已经有5人回复
- 构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上
已经有54人回复
- 基因克隆中酶切连接问题
已经有13人回复
- 幼稚问题一个，在Genbank上查某基因，为何会出现两个mRNA，两个CDS区？
已经有12人回复
- 如何从已知细胞中P出某个基因，并加上酶切位点？
已经有8人回复
- 动物的基因可能一个mRNA翻译后再对肽链剪切而形成2个或者2个以上的几个功能完全不同的
已经有3人回复
- 已取得基因反向测序结果，要先如何处理再上blast比对？
已经有4人回复
- 基因8或者基因9 有中文版吗？在哪里可以购买到？
已经有8人回复
- nature materials上刚刚发表的一篇关于靶向基因输送的论文
已经有13人回复
- 南京工业大学生物与制药工程学院基因组工程与合成生物学平台招聘启事
已经有4人回复
- 关于我的研究课题：水稻抗病基因的表达研究
已经有4人回复
- 【求助/交流】（引物设计）怎么防止pET28a中Nco1的ATG影响目的基因的表达？
已经有9人回复
susizheng
木虫 (著名写手)
我們是糖 甜到憂傷
- BioEPI: 8
- 应助: 130 (高中生)
- 贵宾: 0.008
- 金币: 4738.3
- 散金: 2273
- 红花: 56
- 帖子: 2308
- 在线: 740.7小时
- 虫号: 642666
- 注册: 2008-11-01
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+3, BioEPI+1): 鼓励积极应助！ 2012-03-01 18:09:25
njyang2006(金币+2): ★★★很有帮助 2012-03-02 19:49:37
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+3, BioEPI+1): 鼓励积极应助！ 2012-03-01 18:09:25
njyang2006(金币+2): ★★★很有帮助 2012-03-02 19:49:37
|
如果按照vector软件操作说明上一步一步来，先将片段酶切，再将载体酶切，再连接，这样软件会识别酶切位点处的粘性末端，方向软件会自动识别。（当然这样画图谱我觉得挺麻烦的） 我一般直接将载体两酶切位点间其他酶切位点序列删掉，然后将目的片段当序列插入到载体两酶切位点中（估计你也想这么干），然后将插入的序列add feature。遇到你这种启动子和终止子方向相反的情况，我先将目的基因reverse一下，然后同上面操作。这时候add feature时，在complementary前面打上勾，这样基因就和启动子方向保持一致了。 |
3楼2012-03-01 14:06:04
chuan2388
金虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 505.9
- 散金: 5
- 帖子: 242
- 在线: 92.2小时
- 虫号: 733734
- 注册: 2009-03-28
- 专业: 微生物遗传育种学
9楼2012-03-02 17:34:56
njyang2006
金虫 (正式写手)
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 2715.8
- 散金: 1341
- 红花: 7
- 帖子: 941
- 在线: 172.8小时
- 虫号: 765159
- 注册: 2009-05-07
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2012-03-01 13:42:38
njyang2006
金虫 (正式写手)
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 2715.8
- 散金: 1341
- 红花: 7
- 帖子: 941
- 在线: 172.8小时
- 虫号: 765159
- 注册: 2009-05-07
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
4楼2012-03-01 14:23:31
susizheng
木虫 (著名写手)
我們是糖 甜到憂傷
- BioEPI: 8
- 应助: 130 (高中生)
- 贵宾: 0.008
- 金币: 4738.3
- 散金: 2273
- 红花: 56
- 帖子: 2308
- 在线: 740.7小时
- 虫号: 642666
- 注册: 2008-11-01
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
5楼2012-03-01 17:05:29
6楼2012-03-02 14:29:55
njyang2006
金虫 (正式写手)
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 2715.8
- 散金: 1341
- 红花: 7
- 帖子: 941
- 在线: 172.8小时
- 虫号: 765159
- 注册: 2009-05-07
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
7楼2012-03-02 16:45:26
susizheng
木虫 (著名写手)
我們是糖 甜到憂傷
- BioEPI: 8
- 应助: 130 (高中生)
- 贵宾: 0.008
- 金币: 4738.3
- 散金: 2273
- 红花: 56
- 帖子: 2308
- 在线: 740.7小时
- 虫号: 642666
- 注册: 2008-11-01
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
8楼2012-03-02 16:47:25
寒亦乔51
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1380.3
- 散金: 100
- 红花: 2
- 帖子: 79
- 在线: 41.1小时
- 虫号: 2750714
- 注册: 2013-10-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
10楼2016-03-18 11:36:49