应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问用Vector NTI如何实现在pET28a中加入目的基因片段的谱图绘制。
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3770  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

njyang2006

金虫 (正式写手)

[求助] 请问用Vector NTI如何实现在pET28a中加入目的基因片段的谱图绘制。

本人选用上游Nde I，下游Xho I酶切位点。
绘制谱图时发现pET28a的谱图中启动子和终止子的顺序刚好与实际的方向相反，请问这种情况下，如何把目的基因片段添加进去？
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

寒亦乔51

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-03-01 13:09:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
引用回帖:
7楼: Originally posted by njyang2006 at 2012-03-02 16:45:26:
是pET28a的载体序列方向与基因的序列方向相反

插入之前先将目的基因reverse一下，
怎么会还相反呢？请问你确定你的基因reverse过了？
赞一下 回复此楼
Thank-you，so-blue.
8楼2012-03-02 16:47:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

njyang2006

金虫 (正式写手)
自己顶一下，沉下去就没戏了
赞一下 回复此楼
2楼2012-03-01 13:42:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+3, BioEPI+1): 鼓励积极应助！ 2012-03-01 18:09:25
njyang2006(金币+2): ★★★很有帮助 2012-03-02 19:49:37
如果按照vector软件操作说明上一步一步来，先将片段酶切，再将载体酶切，再连接，这样软件会识别酶切位点处的粘性末端，方向软件会自动识别。（当然这样画图谱我觉得挺麻烦的）

我一般直接将载体两酶切位点间其他酶切位点序列删掉，然后将目的片段当序列插入到载体两酶切位点中（估计你也想这么干），然后将插入的序列add feature。遇到你这种启动子和终止子方向相反的情况，我先将目的基因reverse一下，然后同上面操作。这时候add feature时，在complementary前面打上勾，这样基因就和启动子方向保持一致了。
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
3楼2012-03-01 14:06:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

njyang2006

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by susizheng at 2012-03-01 14:06:04:
如果按照vector软件操作说明上一步一步来，先将片段酶切，再将载体酶切，再连接，这样软件会识别酶切位点处的粘性末端，方向软件会自动识别。（当然这样画图谱我觉得挺麻烦的）

我一般直接将载体两酶切位点间其 ...

谢谢你的回复，不过按照你的这个操作了之后，片段的顺序仍旧是反的
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-01 14:23:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂 +14 a1708 2026-04-06 14/700 2026-04-08 15:35 by 环化材-小生
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +19 额cc 2026-04-06 20/1000 2026-04-08 15:29 by screening
[考研] 315求调剂 +17 欣喜777 2026-04-04 18/900 2026-04-08 13:54 by hangsimei
[考研] 22408 调剂材料 +7 我叫ez 2026-04-06 8/400 2026-04-07 17:12 by 蓝云思雨
[考研] 材料工程302分求调剂 +13 zyx上岸！ 2026-04-04 13/650 2026-04-07 11:14 by 诗与自由
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业 +9 what张 2026-04-01 11/550 2026-04-07 09:45 by momo皓
[考研] 333求调剂 +6 合乘杨习夕 2026-04-06 6/300 2026-04-07 09:44 by 猪会飞
[考研] 285求调剂 +15 哦呦呼o 2026-04-04 17/850 2026-04-06 23:02 by chenzhimin
[考研] 085405软件工程301分求调剂，专硕可跨专业，四六级已过 +3 静静想想 2026-04-05 3/150 2026-04-06 15:23 by nepu_uu
[考研] 319求调剂 +3 handrui 2026-04-05 3/150 2026-04-06 09:33 by jp9609
[考研] 085600，320分求调剂 +16 大馋小子 2026-04-04 17/850 2026-04-06 07:58 by MOF_Catal
[考研] 0832食品科学与工程学硕282调剂 +6 鱼在水中游a 2026-04-02 9/450 2026-04-05 11:45 by flysky1234
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-04 4/200 2026-04-05 09:44 by zhq0425
[考研] 083200 333求调剂 +3 十二！！ 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:28 by barlinike
[考研] 338求调剂 +7 晟功? 2026-04-03 7/350 2026-04-04 20:37 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿中国石油大学化学工程323分求调剂 +4 化工专硕323分 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:12 by dongzh2009
[考研] 求调剂 +3 usbdndj 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:10 by dxiaoxin
[考研] 求材料调剂 一志愿南昌大学 328分 +5 yyy..... 2026-04-03 5/250 2026-04-03 13:46 by 百灵童888
[考研] 土木水利328分求调剂 +6 疾风知劲草666 2026-04-02 6/300 2026-04-03 11:38 by znian
[考研] 313求调剂 +3 ～微微凉～ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭