| 查看: 3775 | 回复: 10 | ||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
njyang2006金虫 (正式写手)
|
[求助]
请问用Vector NTI如何实现在pET28a中加入目的基因片段的谱图绘制。
|
|
|
本人选用上游Nde I，下游Xho I酶切位点。 绘制谱图时发现pET28a的谱图中启动子和终止子的顺序刚好与实际的方向相反，请问这种情况下，如何把目的基因片段添加进去？  |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
寒亦乔51» 猜你喜欢
280求调剂
已经有3人回复
-
085400 328分 求调剂
已经有7人回复
-
材料专硕322
已经有12人回复
-
一志愿华中农微生物，288分，三年实验经历
已经有3人回复
-
314求调剂
已经有14人回复
-
调剂 化学 307
已经有11人回复
-
化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文
已经有10人回复
-
材料299专硕求调剂
已经有5人回复
-
083200 初试305分 求调剂
已经有10人回复
-
332，085601求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教一下两种光谱的区别和一个实验的可行性
已经有3人回复
- 【教程】岛津LC-20AT型高效液相色谱仪图文操作手册
已经有260人回复
- 如何获得一个酶的基因
已经有5人回复
- 反转录之后PCR扩增片段问题的请教，急急急
已经有5人回复
- 构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上
已经有54人回复
- 基因克隆中酶切连接问题
已经有13人回复
- 幼稚问题一个，在Genbank上查某基因，为何会出现两个mRNA，两个CDS区？
已经有12人回复
- 如何从已知细胞中P出某个基因，并加上酶切位点？
已经有8人回复
- 动物的基因可能一个mRNA翻译后再对肽链剪切而形成2个或者2个以上的几个功能完全不同的
已经有3人回复
- 已取得基因反向测序结果，要先如何处理再上blast比对？
已经有4人回复
- 基因8或者基因9 有中文版吗？在哪里可以购买到？
已经有8人回复
- nature materials上刚刚发表的一篇关于靶向基因输送的论文
已经有13人回复
- 南京工业大学生物与制药工程学院基因组工程与合成生物学平台招聘启事
已经有4人回复
- 关于我的研究课题：水稻抗病基因的表达研究
已经有4人回复
- 【求助/交流】（引物设计）怎么防止pET28a中Nco1的ATG影响目的基因的表达？
已经有9人回复
6楼2012-03-02 14:29:55
njyang2006
金虫 (正式写手)
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 2715.8
- 散金: 1341
- 红花: 7
- 帖子: 941
- 在线: 172.8小时
- 虫号: 765159
- 注册: 2009-05-07
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2012-03-01 13:42:38
susizheng
木虫 (著名写手)
我們是糖 甜到憂傷
- BioEPI: 8
- 应助: 130 (高中生)
- 贵宾: 0.008
- 金币: 4738.3
- 散金: 2273
- 红花: 56
- 帖子: 2308
- 在线: 740.7小时
- 虫号: 642666
- 注册: 2008-11-01
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+3, BioEPI+1): 鼓励积极应助！ 2012-03-01 18:09:25
njyang2006(金币+2): ★★★很有帮助 2012-03-02 19:49:37
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+3, BioEPI+1): 鼓励积极应助！ 2012-03-01 18:09:25
njyang2006(金币+2): ★★★很有帮助 2012-03-02 19:49:37
|
如果按照vector软件操作说明上一步一步来，先将片段酶切，再将载体酶切，再连接，这样软件会识别酶切位点处的粘性末端，方向软件会自动识别。（当然这样画图谱我觉得挺麻烦的） 我一般直接将载体两酶切位点间其他酶切位点序列删掉，然后将目的片段当序列插入到载体两酶切位点中（估计你也想这么干），然后将插入的序列add feature。遇到你这种启动子和终止子方向相反的情况，我先将目的基因reverse一下，然后同上面操作。这时候add feature时，在complementary前面打上勾，这样基因就和启动子方向保持一致了。 |
3楼2012-03-01 14:06:04
njyang2006
金虫 (正式写手)
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 2715.8
- 散金: 1341
- 红花: 7
- 帖子: 941
- 在线: 172.8小时
- 虫号: 765159
- 注册: 2009-05-07
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
4楼2012-03-01 14:23:31
100