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彼岸鸢尾

铜虫 (初入文坛)

[求助] pet30a原核表达蛋白大小问题

求助各位大侠。本人用pet30a表达轮状病毒非结构蛋白NSP4,这个蛋白大小为28KD,但是跑了SDS-PAGE大小显示为34-43KD条带之间,我的酶切位点是Bgl II和KpnI.不知道问题出在哪儿。急求
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华丽的沉默,也许是解脱。
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liangxiuyan

木虫 (职业作家)

楼主你这两个酶切位点是相邻的 ,酶切的时候可以切开么
每一段路途,都是为了成就一段梦想
5楼2012-07-16 17:09:05
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
彼岸鸢尾(金币+2): 有帮助 2012-03-05 09:18:13
正常,前面多了三十多个氨基酸,分子量要大4KD左右。另外SDS-PAGE显示的分子量是表观分子量,不一定准的,要准还是质谱。
2楼2012-03-01 07:58:58
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彼岸鸢尾

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by lxj341401 at 2012-03-01 07:58:58:
正常,前面多了三十多个氨基酸,分子量要大4KD左右。另外SDS-PAGE显示的分子量是表观分子量,不一定准的,要准还是质谱。

那这样会不会对以后蛋白功能的研究产生影响呢?
华丽的沉默,也许是解脱。
3楼2012-03-01 20:01:33
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 彼岸鸢尾 at 2012-03-01 20:01:33:
那这样会不会对以后蛋白功能的研究产生影响呢?

会不会影响不好说的,不同蛋白不一样的。
4楼2012-03-01 21:03:48
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