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wanghuiyanyx
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[求助]
RNA样品中的未除尽基因组DNA
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用Qiagen小提试剂盒（包括柱子上DNaseI处理过程）提取细菌RNA用于芯片，电泳看不到基因组条带，但是以此样品作为模板进行PCR，却可以扩增出目的片段！这样的样品是否还需要再进行DNaseI处理？但是担心这样再处理一遍会导致样品被稀释，且RNA纯度受影响。请高手指教！ [ Last edited by wanghuiyanyx on 2012-2-28 at 22:08 ] |
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4楼2012-02-29 10:50:35
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 还是很热心哦 2012-02-29 10:00:19
wanghuiyanyx(金币+20): ★★★很有帮助 2012-02-29 10:36:27
小丹木木(金币+2): 还是很热心哦 2012-02-29 10:00:19
wanghuiyanyx(金币+20): ★★★很有帮助 2012-02-29 10:36:27
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用于芯片估计对DNA污染要求很高吧？ 个人经验：柱上消化效率不如在溶液体系里加DNase I消化。 既然你都提出来RNA了只能再进行DNaseI消化处理一次咯，当然，消化处理后用柱子或氯仿抽提一次即可不必担心纯度及浓度的问题（亦可去掉DNaseI）。不过你需要担心的是操作得非常谨慎注意，切勿到时把DNA消化干净了，RNA也跟着去了... 祝好！ |
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wanghuiyanyx2楼2012-02-29 09:16:13
wanghuiyanyx 
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3楼2012-02-29 10:21:51
wanghuiyanyx
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5楼2012-02-29 12:15:54
