| 查看: 4630 | 回复: 18 | |||
嘟噜金虫 (小有名气)
|
[求助]
丝状真菌菌丝体破碎细胞壁，不要胞内酶，求助最简单的实验方法。。。
|
||
| 如题，想用有机溶剂乙酸乙酯萃取丝状真菌菌丝体内的小分子化合物分子量低于500，不要胞内酶，想求助最简单实用的具体实验方法，超声波破碎法就不要说了，实验室没有超声波破碎仪，高压匀浆法也绕行吧，也没有仪器。其实我就是想知道用什么有机溶剂浸泡可以裂解真菌细胞壁，具体比例，浸泡时间等，如果是反复冻融法，想问问反复冻融具体几次啊，想找个最简单而且实用的。。。。。。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生工检测理论与实务 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
» 猜你喜欢
327求调剂
已经有16人回复
-
085600材料与化工329分求调剂
已经有16人回复
-
考研调剂
已经有8人回复
-
279学硕食品专业求调剂院校
已经有23人回复
-
各位老师好，求调剂，本科211，一志愿天津大学生物与医药学硕，差两名录取。
已经有8人回复
-
288求调剂，一志愿华南理工大学071005
已经有21人回复
-
化学070300 求调剂
已经有19人回复
-
B区0809 ，数一英一，290 求调剂
已经有4人回复
-
290求调剂
已经有16人回复
-
274求调剂
已经有8人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求丝状真菌的乙醇脱氢酶活性检测的实验方法~
已经有10人回复
- 毕赤酵母细胞如何破碎
已经有12人回复
- 判断一稿多投的最简单方法
已经有16人回复
- 求助：粪便中微生物细胞的提取方法？
已经有4人回复
- 丝状菌数量的定性方法有哪些?
已经有14人回复
- 关于胞内酶表达
已经有3人回复
- 怎样测定真菌菌丝体的浓度或含量？
已经有17人回复
- 真菌菌丝离心问题
已经有11人回复
- 曲霉菌细胞壁破碎方法，需要胞内酶，用液氮可以么，对胞内酶活性有影响么？
已经有3人回复
- 请问哪个实验室有丝状真菌表达系统
已经有5人回复
- 如何回收产胞内酶的微生物细胞？
已经有6人回复
- 求助细胞内活性氧定量检测实验方法！
已经有18人回复
- 黑曲霉细胞壁结构？
已经有8人回复
- 求助！！真菌拮抗试验
已经有13人回复
- 跪求，超声波破碎真菌细胞壁的条件，在线等。。。。
已经有20人回复
- 求助裂解细胞又不降低酶活
已经有5人回复
- 大肠杆菌培养及破碎
已经有11人回复
- 乳酸菌破碎用的溶菌酶
已经有14人回复
- 真菌菌丝超声破碎条件
已经有8人回复
- 关于细胞摄取新型制剂实验，请问有什么最新的实验方法，可以发好点文章
已经有4人回复
- 【求助】小球藻（细胞壁）破碎方法
已经有11人回复
- 【求助/交流】如何对霉菌破胞测定其胞内酶活？急！
已经有10人回复
- 【求助/交流】怎样能使细胞破裂
已经有21人回复
jiyannangxj
至尊木虫 (著名写手)
美女搞科研
- MicEPI: 2
- 应助: 181 (高中生)
- 贵宾: 0.013
- 金币: 13145.5
- 散金: 32
- 红花: 109
- 帖子: 2948
- 在线: 630.8小时
- 虫号: 965914
- 注册: 2010-03-09
- 性别: MM
- 专业: 天然有机化学
【答案】应助回帖
|
1、高速组织捣碎：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。 2、玻璃匀浆器匀浆：先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎，此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高，适用于量少和动物脏器组织。 3、超声波处理法：用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂，此法多适用于微生物材料，用大肠杆菌制备各种酶，常选用50-100毫克菌体/毫升浓度，在1KG至10KG频率下处理10-15分钟，此法的缺点是在处理过程会产生大量的热，应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。 4、反复冻融法：将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。 5、化学处理法：有些动物细胞，例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠（SDS）、去氧胆酸钠等细胞膜破坏，细菌细胞壁较厚，可采用溶菌酶处理效果更好。 无论用哪一种方法破碎组织细胞，都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中，使大分子生物降解，导致天然物质量的减少，加入二异丙基氟磷酸（DFP）可以抑制或减慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲磺酰氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酥活力，但不是全部，还可通过选择pH、温度或离子强度等，使这些条件都要适合于目的物质的提取。 |
10楼2012-02-27 19:22:07
jiyannangxj
至尊木虫 (著名写手)
美女搞科研
- MicEPI: 2
- 应助: 181 (高中生)
- 贵宾: 0.013
- 金币: 13145.5
- 散金: 32
- 红花: 109
- 帖子: 2948
- 在线: 630.8小时
- 虫号: 965914
- 注册: 2010-03-09
- 性别: MM
- 专业: 天然有机化学
2楼2012-02-27 00:56:16
送鲜花一朵
  |
3楼2012-02-27 00:57:54
plumplumgxc
金虫 (正式写手)
- 应助: 33 (小学生)
- 金币: 917.2
- 散金: 300
- 红花: 5
- 帖子: 675
- 在线: 165.6小时
- 虫号: 1237166
- 注册: 2011-03-18
- 性别: MM
- 专业: 生物防治
4楼2012-02-27 08:47:29
jiyannangxj
至尊木虫 (著名写手)
美女搞科研
- MicEPI: 2
- 应助: 181 (高中生)
- 贵宾: 0.013
- 金币: 13145.5
- 散金: 32
- 红花: 109
- 帖子: 2948
- 在线: 630.8小时
- 虫号: 965914
- 注册: 2010-03-09
- 性别: MM
- 专业: 天然有机化学
5楼2012-02-27 09:39:24
6楼2012-02-27 10:46:24
7楼2012-02-27 11:46:26
8楼2012-02-27 15:47:37
jiyannangxj
至尊木虫 (著名写手)
美女搞科研
- MicEPI: 2
- 应助: 181 (高中生)
- 贵宾: 0.013
- 金币: 13145.5
- 散金: 32
- 红花: 109
- 帖子: 2948
- 在线: 630.8小时
- 虫号: 965914
- 注册: 2010-03-09
- 性别: MM
- 专业: 天然有机化学
9楼2012-02-27 19:21:10
