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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 丝状真菌菌丝体破碎细胞壁，不要胞内酶，求助最简单的实验方法。。。
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flyfish7271

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我在实验室是先用匀浆机匀浆之后，再加入丙酮浸提的
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11楼2012-02-27 19:30:14
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穆跃眇

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
液氮研磨：4到8层纱布挤干菌丝中培养液，PBS洗两遍并挤干，转移到研钵中，加液氮，待液氮快挥发完时研磨，如此研磨三次可破碎菌体
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12楼2012-02-27 19:54:43
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271152859

新虫 (初入文坛)
用预冷的丙酮搅拌破碎霉菌细胞，丙酮与菌泥的液固比大概是10:1，处理1个小时左右
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13楼2012-04-06 23:32:36
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guyanling

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 271152859 at 2012-04-06 23:32:36
用预冷的丙酮搅拌破碎霉菌细胞，丙酮与菌泥的液固比大概是10:1，处理1个小时左右

请问丙酮是用的纯丙酮吗？需要稀释吗？
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14楼2013-10-23 19:34:28
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guyanling

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by flyfish7271 at 2012-02-27 19:30:14
我在实验室是先用匀浆机匀浆之后，再加入丙酮浸提的

用纯丙酮还是要稀释？比例呢？求回复啊
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15楼2013-10-23 19:48:58
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yangjun130

铜虫 (小有名气)
菌体分离干燥后酸解

[ 发自小木虫客户端 ]
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16楼2013-10-24 06:19:11
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flyfish7271

新虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by guyanling at 2013-10-23 19:34:28
请问丙酮是用的纯丙酮吗？需要稀释吗？...

70%丙酮
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17楼2013-10-25 21:45:05
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qdw54321

金虫 (小有名气)
冻融法：一般反复3次；一般可以用碱裂解法：就是用EDTA和Tris等，你可以搜搜；也可以用溶菌酶。网上都有
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做我想做
18楼2015-07-09 18:44:17
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orangeleaf

铜虫 (正式写手)
最简单的：石英砂常温研磨，磨啊磨啊磨
其次：液氮研磨，磨啊磨
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工业酶-T180;AU-400FLD;B85vanguard;E3-1280v3;NH-D9L;8GBx2;R7-250A-ZLH4;Black500GB;EA191M;SK-8115;M111s
19楼2015-07-10 14:23:09
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