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haylig

铜虫 (小有名气)

[交流] 如何回收产胞内酶的微生物细胞? 已有4人参与

各位,我在研究一种胞内酶的全细胞催化底物工艺研究,即将发酵液中含有胞内酶的微生物细胞离心收集后添加到底物溶液中,吹打均匀后进行酶反应,底物催化完后再离心收集细胞进行下一批酶反应,在这个工艺中我怀疑两点对酶的损伤较大:
1. 微生物细胞收集离心力太大,约6000g
2. 每次离心完的细胞较紧实,需要用滴管搅拌吹打均匀后加入到底物溶液中
这两种机械力是否对细胞的损伤较大,可能会导致细胞破裂,胞内酶随着每次离心损失较大,使得定量的细胞酶对底物催化效率逐渐下降
麻烦做过细菌发酵生产胞内酶并进行酶反应的相互探讨一下。细胞培养的也可以给点建议(什么操作对细胞的完整有重要影响),谢谢。
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鱼鸢

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
离心收集没有多大损伤,主要是麻烦,处理量比较小,可以试试超滤。
2楼2012-10-09 17:19:42
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haylig

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 鱼鸢 at 2012-10-09 17:19:42
离心收集没有多大损伤,主要是麻烦,处理量比较小,可以试试超滤。

那收集后用滴管吹打均匀对细胞有影响吗
3楼2012-10-09 17:41:14
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biolio2009

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
为什么不做成固定化了得细胞,然后做催化应用实验呢
4楼2012-10-10 09:01:52
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haylig

铜虫 (小有名气)

考虑到大规模生产的固定化成本问题,市场前景,先用游离酶细胞做工艺研究,我们的最后目标是固定化,
5楼2012-10-11 18:30:03
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
都不会对酶有损害,没那么娇嫩。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2012-10-12 06:38:58
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cjzpx

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主,我做的也是转化,只是还没有到发酵的阶段,敢问楼主做的底物是什么啊?哪个学校的啊,以后有不懂的请教你
阳光love生活
7楼2012-10-12 08:53:29
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