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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 丝状真菌菌丝体破碎细胞壁，不要胞内酶，求助最简单的实验方法。。。
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嘟噜

金虫 (小有名气)

[求助] 丝状真菌菌丝体破碎细胞壁，不要胞内酶，求助最简单的实验方法。。。

如题，想用有机溶剂乙酸乙酯萃取丝状真菌菌丝体内的小分子化合物分子量低于500，不要胞内酶，想求助最简单实用的具体实验方法，超声波破碎法就不要说了，实验室没有超声波破碎仪，高压匀浆法也绕行吧，也没有仪器。其实我就是想知道用什么有机溶剂浸泡可以裂解真菌细胞壁，具体比例，浸泡时间等，如果是反复冻融法，想问问反复冻融具体几次啊，想找个最简单而且实用的。。。。。。
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人生需要奋斗
1楼 2012-02-27 00:52:46
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
嘟噜(金币+100): ★★★很有帮助 2012-02-28 12:23:27
这个问题最简单的方法 是用80%的丙酮水溶液，浸泡3--5天，期间，搅拌震荡，便于破壁。希望可以帮到你。。。。金币金币啊 。。。
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5楼2012-02-27 09:39:24
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plumplumgxc

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
液氮研磨
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科研这条道不好走啊。。。
4楼2012-02-27 08:47:29
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zhanglijie1969

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用乙酸乙酯加上适量石英砂在玻璃研钵中使劲研磨，效果应该不错，而且简单，省时。
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6楼2012-02-27 10:46:24
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wjf008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
乙酸乙酯萃取的话，细胞壁细胞膜中的脂肪酸肯定会留到你的目的产物中的，细胞的部分破碎也会使胞内泄漏。不过其实酶对产物分离影响是不大的，分子量差距比较大。就是那些短链的脂肪酸比较难办。萃取的具体条件根据细胞膜的成分不同是有差异的，所以还是以实验数据为参考。
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7楼2012-02-27 11:46:26
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