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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 微量紫外测DNA OD260\OD280的比值
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chenting21

新虫 (初入文坛)

[求助] 微量紫外测DNA OD260\OD280的比值

用试剂盒提取的DNA，也加过RNA酶，且酶没有问题，可是 OD260\OD280的比值在1.95以上，有时达到2.0.有文献说应该在1.7-1.9，请问有用过微量紫外测DNA的同学们，你们的值是多少?为啥超过范围。
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1楼 2012-02-23 21:30:49
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smilerion

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.8到2均可，高了是RNA污染吧
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2楼2012-02-24 04:09:57
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longrna

新虫 (正式写手)

wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2012-02-25 16:09:58
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2012-02-25 16:10:07
260/280没有那么死的硬性死规定。1.9跟1.95能有质的差异吗？我不觉得
你也可以电泳看一下有没有RNA嘛（跑时间不要长）
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chenting21
伟大航线....
3楼2012-02-24 09:10:02
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bst5

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励下 2012-02-25 19:07:24
看你最后一步用什么溶解的，如果是kit中的elution，比值会偏高一点，如果用蒸馏水溶解可能会好一点，但是看你的比值，对你后面的实验应该影响不大。不知你后续要做什么实验
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chenting21
4楼2012-02-24 09:30:26
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chenting21

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by smilerion at 2012-02-24 04:09:57:
1.8到2均可，高了是RNA污染吧

加过RNA酶了
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5楼2012-02-25 10:17:38
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chenting21

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by longrna at 2012-02-24 09:10:02:
260/280没有那么死的硬性死规定。1.9跟1.95能有质的差异吗？我不觉得
你也可以电泳看一下有没有RNA嘛（跑时间不要长）

电泳是没有RNA带的，260/280是评价DNA纯度的一个指标，这个达不到，没办法做下个实验
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6楼2012-02-25 10:21:56
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chenting21

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by bst5 at 2012-02-24 09:30:26:
看你最后一步用什么溶解的，如果是kit中的elution，比值会偏高一点，如果用蒸馏水溶解可能会好一点，但是看你的比值，对你后面的实验应该影响不大。不知你后续要做什么实验

用kit中的洗脱的，是洗脱液造成的吗，我用洗脱液做空白，除去背景了，还会有影响吗？
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7楼2012-02-25 10:24:29
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
260/280 评价的是蛋白污染，跟RNA关系不大了。百度下分光光度法测DNA就有很多东西了。
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8楼2012-02-25 19:09:01
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花开花落2

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chenting21: 金币+7, ★★★很有帮助 2012-03-23 09:15:36
DNA降解了～如果降解的话，OD值就会上升，达到2.0甚至以上！有蛋白质的话，OD值是会降低，1.7以下
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9楼2012-03-11 19:45:28
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