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hshzhq

铜虫 (正式写手)

[求助] neomycin/kanamycin resistance gene,这个究竟是指新霉素抗性还是卡那霉素抗性?

如题,在pEGFP-C1克隆载体上有这个序列,问题是这个究竟是指新霉素还是卡那霉素抗性吗?看不明白。希望大家指出。
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+2): good 2012-02-22 18:35:20
pEGFP-C1是穿梭载体,neomycin/kanamycin resistance gene指在大肠杆菌中是卡那霉素抗性,在另外一个宿主中是新霉素。抗性。
2楼2012-02-21 20:50:27
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励下 2012-02-22 18:36:03
引用回帖:
3楼: Originally posted by hshzhq at 2012-02-22 02:22:04:
不是一个基因序列吗?为什么体现为两种效果?

是这种情况,可以参考毕赤酵母穿梭质粒,Kan基因,大肠中表现卡拉抗性,毕赤中表现G418抗性。
Thank-you,so-blue.
4楼2012-02-22 09:01:40
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若水5886

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+2): 鼓励应助 2012-02-22 18:35:45
hshzhq(金币+1): ★★★很有帮助 2012-03-01 11:00:50
穿梭质粒是指一类人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记,因而可以在两种不同类群宿主中存活和复制的质粒载体
如果构建的质粒是想在哺乳动物细胞中使用,而上面只有一个氨苄青霉素的抗性基因,那么你就只能在大肠杆菌中筛选出这个质粒,而没法检验该质粒是否正确地导入了哺乳动物细胞,因为抗生素对哺乳动物细胞无效。
pEGFP-C1克隆载体上的这段序列在不同的宿主细胞里有不同的复制起点,编码出不同的抗性基因。
5楼2012-02-22 11:58:02
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凉亭

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): good 2012-02-22 18:35:52
hshzhq(金币+1): 有帮助 2012-03-01 11:01:10
前者是真核抗性 后者是原核抗性哦 当把质粒转入原核生物如大肠杆菌时表现为Kan抗性,如果将质粒转染入真核细胞,就显示为新霉素抗性。
6楼2012-02-22 13:45:54
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hongqifei

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 若水5886 at 2012-02-22 11:58:02:
穿梭质粒是指一类人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记,因而可以在两种不同类群宿主中存活和复制的质粒载体
如果构建的质粒是想在哺乳动物细胞中使用,而上面只有一个氨苄青霉素的抗性基因,那么你就只能在 ...

pEGFPC1上的Kan和Neo我对过阅读框,是一样,但它们前面有两个启动子,分别在大肠杆菌和真核细胞中启动表达。在大肠杆菌中表现为Kan抗性,在真核细胞中为G418抗性。
何须剑道争锋?千人指,万人封,可问江湖鼎峰,三尺秋水尘不染,天下无双。
9楼2012-02-27 20:30:05
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hshzhq

铜虫 (正式写手)

Kana和Neo的序列是一样,问题就出来了,为什么两个东西,序列确实一样呢?‘
10楼2012-02-28 00:20:17
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ChenYFSCAU

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by hshzhq at 2012-02-28 00:20:17
Kana和Neo的序列是一样,问题就出来了,为什么两个东西,序列确实一样呢?‘

在不同的生物中,由于基因的转录方式不同,特别是密码子偏好的不同,而导致的相同的基因片段在不同的生物中表达出了具有不同氨基酸的物质。
11楼2014-03-15 21:52:13
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普通回帖

hshzhq

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by lxj341401 at 2012-02-21 20:50:27:
pEGFP-C1是穿梭载体,neomycin/kanamycin resistance gene指在大肠杆菌中是卡那霉素抗性,在另外一个宿主中是新霉素。抗性。

不是一个基因序列吗?为什么体现为两种效果?
3楼2012-02-22 02:22:04
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diaoruiying

木虫 (著名写手)

学习了;前段时间刚刚悟出来,呵呵
学会忍耐和承受寂寞
7楼2012-02-22 13:56:13
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hshzhq

铜虫 (正式写手)

谢谢,不过还是有点不懂。pEGFP-C1里面的卡那霉素和新霉素基因是不是重叠了?
8楼2012-02-26 21:02:08
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