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fwhnny

金虫 (小有名气)

[求助] 真核质粒表达!!!!

想表达一个真核质粒蛋白,但转了293之后发现表达率很低,通过免疫荧光发现在镜下视野里只有几个细胞表达了,其余都没有。质粒为:
PC6-目的基因;为了提高表达效率,还特意在前面加上了COZAC序列,具体为:
PC6-GCCACC ATGT。。。
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494750284

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人感觉是转化效率有点低
2楼2012-09-09 21:21:37
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zhaoxueer22

木虫 (小有名气)

初中生

表达效率低有很多原因,查一下是不是有颈环结构,导致基因沉默,或者有没有核定位序列等问题!希望能有所帮助~
每天进步一点点
3楼2012-09-10 12:32:10
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zhaoxueer22

木虫 (小有名气)

初中生

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
表达效率低有很多原因,查一下是不是有颈环结构,导致基因沉默,或者有没有核定位序列等问题!希望能有所帮助
每天进步一点点
4楼2012-09-10 13:14:14
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fwhnny

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 494750284 at 2012-09-09 21:21:37
个人感觉是转化效率有点低

但是别的连在PC6上的基因坐WB能做出来,就它做不出来。
几个质粒同一批做的
5楼2012-09-12 21:50:10
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fwhnny

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaoxueer22 at 2012-09-10 13:14:14
表达效率低有很多原因,查一下是不是有颈环结构,导致基因沉默,或者有没有核定位序列等问题!希望能有所帮助

能具体讲下吗?呵呵
6楼2012-09-12 21:53:17
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