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pplu0329

木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白表达不明确,但是连菌体蛋白都不见

我用50ul菌液加入5mlLB培养基中,摇菌扩增16h后按2%比例转接到200mlLB培养基中,摇2h后加入IPTG诱导表达4h,收菌跑胶,可是泳道上连菌体蛋白都看不见?请教下是什么情况?
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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看天(金币+2): 鼓励回答 2012-03-01 15:26:22
pplu0329(金币+1): 有帮助 2012-03-01 16:32:04
个人觉得你处理样品有问题,你试试离心后弃上清,将沉淀用buffer充分悬浮后再加热,至少10分钟吧。加热后的样品不应该粘稠的。应该和MARKER是差不多状态。最多会有点沉淀。
9楼2012-03-01 11:09:25
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