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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白质纯化过程中的活性问题
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chengfs

金虫 (著名写手)

[求助] 蛋白质纯化过程中的活性问题

问个问题哈，如果我的蛋白质溶液的pH在调整的时候不小心正好跨过了它的等电点。这样是不是这个蛋白就沉淀失活了啊？
比如我的蛋白的等电点是  5.0. 我不小心将溶液从pH 8.0调到4.0又调回了7.0.这样是不是就失活了啊？
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1楼 2012-01-28 11:10:08
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流！ 2012-01-28 16:18:02
一般不会，等电点因为不带电荷，没有了同电相斥，容易蓄积，但不代表它变性。通常继续调节ph会重新溶解，但不是所有蛋白都这样，我遇到过复溶不了的。
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2楼2012-01-28 14:48:20
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落满夏天

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2012-01-29 16:30:56
chengfs(金币+2): 2012-02-28 04:47:45
看你的蛋白在哪个PH下稳定了，在等电点附近会有沉淀但不会失活，4.0我觉得没有问题，中性没问题，8.0的话你试试看，可能也没事。一般来说不会这么敏感的。
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星星之火，可以燎原
3楼2012-01-29 15:27:51
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chengfs

金虫 (著名写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by 落满夏天 at 2012-01-29 15:27:51:
看你的蛋白在哪个PH下稳定了，在等电点附近会有沉淀但不会失活，4.0我觉得没有问题，中性没问题，8.0的话你试试看，可能也没事。一般来说不会这么敏感的。

谢谢达人
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4楼2012-01-29 22:02:49
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chengfs

金虫 (著名写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by lzgxgz at 2012-01-28 14:48:20:
一般不会，等电点因为不带电荷，没有了同电相斥，容易蓄积，但不代表它变性。通常继续调节ph会重新溶解，但不是所有蛋白都这样，我遇到过复溶不了的。

谢谢达人。
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5楼2012-01-29 22:02:59
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leoselphin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chengfs(金币+1): 2012-02-28 04:47:27
chengfs(金币+2): 2012-03-02 22:23:26
你可以测一下比活，但是一般不要这么差的ph太大吧
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6楼2012-02-26 09:38:12
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mosquitoe
7楼2012-03-06 10:39:41
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jiaoguan

铜虫 (初入文坛)
应该不会变性！！
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8楼2012-07-23 10:13:02
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