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pet-24a 原核表达
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成龙平
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 3
帖子: 5
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虫号: 1392547
注册: 2011-09-06
专业: 植物生理与生化
[
求助
]
pet-24a 原核表达
我在pET-24a上连了一基因,做了原核表达后(37℃,16℃都做了),没有表达出来(与对照的一样,没有条带)。请问各位,这是什么原因啊?
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1楼
2012-01-14 14:54:27
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blackrose8089
铁杆木虫
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专业: 植物学研究的新技术、新方
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
IPTG浓度?蛋白亲疏水性?跨膜情况?
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jiayoubashaonian
4楼
2012-01-14 17:31:10
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snoopyzxx
木虫
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虫号: 548497
注册: 2008-04-19
性别:
MM
专业: 全球变化生态学
你怎么坐的,详细点讲一下,不然别人不好分析啊。
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VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
2楼
2012-01-14 15:49:33
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海阔天空8158
木虫
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注册: 2009-05-14
性别: GG
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+1): 说的非常对 2012-01-14 17:28:53
同意楼上的。这需要楼主提供很多细节,不然没有正对性。
而且,还要保证各项试剂的都是没有任何问题的,楼主的操作也没有任何失误,条件也进行了优化。有时候,可能有很低的表达量,只是没有检测到而已。
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(1人)
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天行健,君子以自强不息;地势坤,君子以厚德载物。
3楼
2012-01-14 17:27:45
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lxj341401
至尊木虫
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虫号: 111074
注册: 2005-11-20
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
能不能表达不仅仅和温度有关系,和你要表达的蛋白的性质,比如毒性、密码子偏爱性、ORF等都有关系的。
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5楼
2012-01-14 21:42:59
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