24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1536  |  回复: 5

成龙平

新虫 (初入文坛)

[求助] pet-24a 原核表达

我在pET-24a上连了一基因,做了原核表达后(37℃,16℃都做了),没有表达出来(与对照的一样,没有条带)。请问各位,这是什么原因啊?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)

你怎么坐的,详细点讲一下,不然别人不好分析啊。
VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
2楼2012-01-14 15:49:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海阔天空8158

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+1): 说的非常对 2012-01-14 17:28:53
同意楼上的。这需要楼主提供很多细节,不然没有正对性。
而且,还要保证各项试剂的都是没有任何问题的,楼主的操作也没有任何失误,条件也进行了优化。有时候,可能有很低的表达量,只是没有检测到而已。
天行健,君子以自强不息;地势坤,君子以厚德载物。
3楼2012-01-14 17:27:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
IPTG浓度?蛋白亲疏水性?跨膜情况?
jiayoubashaonian
4楼2012-01-14 17:31:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
能不能表达不仅仅和温度有关系,和你要表达的蛋白的性质,比如毒性、密码子偏爱性、ORF等都有关系的。
5楼2012-01-14 21:42:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gjs713

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个你得说的详细点,不然不好帮你 分析啊。
首先你至少要q确定你的基因已经正确表达,通过测序证明序列没有发生太多突变,表达时没有发生移码突变等等。
其次,表达过程的温度,pH,诱导浓度,时间等等条件是否合适,都是需要考虑的因素。
勤奋、执着、专注,则无坚不破。
6楼2012-01-15 20:13:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 成龙平 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 300分求调剂 (085501机械专硕,本科扬大) +9 xu@841019 2026-04-11 10/500 2026-04-14 08:48 by 木木mumu~
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +8 笑笑袁 2026-04-10 8/400 2026-04-14 08:44 by screening
[考研] 人工智能320调剂08工类还有机会吗 +17 振—TZ 2026-04-10 18/900 2026-04-14 08:15 by Equinoxhua
[考研] 327求调剂 +21 Xxjc1107. 2026-04-13 23/1150 2026-04-13 21:53 by bljnqdcc
[考研] 266调剂 +10 daya sun 2026-04-07 11/550 2026-04-13 10:12 by fenglj492
[考研] 一志愿华中农微生物,288分,三年实验经历 +11 代fish 2026-04-09 11/550 2026-04-12 10:21 by Hayaay
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 303求调剂 +14 SereinQ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 20:43 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +6 电气300求调剂不 2026-04-08 6/300 2026-04-11 20:14 by 逆水乘风
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 085506-求调剂-285分 +3 雷欧飞踢 2026-04-08 3/150 2026-04-11 08:37 by zhq0425
[考研] 一志愿矿大,材料工程专硕314分,0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 071000生物学调剂求助 +17 zzzzwww 2026-04-09 20/1000 2026-04-10 15:55 by 求调剂zz
[考研] 301求调剂 +5 149. 2026-04-10 5/250 2026-04-10 15:45 by 柴小白
[考研] 293调剂 +25 yj1221 2026-04-08 26/1300 2026-04-10 15:02 by 柴小白
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +7 超人不会飞@ 2026-04-08 7/350 2026-04-09 09:35 by gong120082
[考研] 353求调剂 +8 晴空万里air 2026-04-07 8/400 2026-04-09 00:18 by GouQ
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
[考研] 电子信息346 +4 zuoshaodian 2026-04-08 4/200 2026-04-08 11:54 by zzucheup
[考研] 325 调剂 +6 QQ小虾 2026-04-07 6/300 2026-04-07 15:17 by Ccclqqq
信息提示
请填处理意见