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twisty

木虫 (正式写手)

newer

[求助] 蛋白表达疑问

纯化出来的目的蛋白经鉴定为糖蛋白,在做原核或真核表达时是否须要将其所连接的糖链切去?如果须要应用何种方法?

[ 来自科研家族 Natural Products家族 ]
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼上几位说的很好,楼主要多补补分子生物和细胞生物的知识了;蛋白表达的过程:第一步是DNA转录为mRNA,第二步是转录后修饰(包括内含子的翦切与拼接、5'端加帽等,一般原核生物没有),第三步是翻译,即由DNA翻译为蛋白质,第四步为翻译后修饰(包括二硫键形成(有些是在翻译过程中进行,有些是在翻译后进行,原核生物不是很多),糖基化(包括O糖基化和N糖基化,在内网和高尔基体中形成,原核生物没有),酶原成熟(剪切、拼接、磷酸化、硫酸化)等);你把这些搞懂了之后就会发现你的问题是一个错误的问题
5楼2011-12-24 22:15:34
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+3, MolEPI+1): Good! 2011-12-24 15:31:13
twisty(金币+2): ★★★很有帮助 2011-12-25 09:18:17
做表达的时候基因都是只编码蛋白序列的,至于能不能糖基化、在什么位置糖基化、糖基化的程度和加上什么糖基等只跟宿主有关。你克隆的时候无须将其所连接的糖链切去的。
2楼2011-12-24 00:30:38
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twisty

木虫 (正式写手)

newer

引用回帖:
: Originally posted by lxj341401 at 2011-12-24 00:30:38:
做表达的时候基因都是只编码蛋白序列的,至于能不能糖基化、在什么位置糖基化、糖基化的程度和加上什么糖基等只跟宿主有关。你克隆的时候无须将其所连接的糖链切去的。

常规的切去方法有哪些啊?没做过还请不吝赐教啊。
兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&n...
3楼2011-12-24 11:05:47
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AnaSequence

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-24 15:31:28
糖基化是翻译后修饰,原核表达一般缺乏糖基化修饰系统,所表达的蛋白没有糖链.真核一般有糖基化,但是不同的宿主,糖链的糖基和长度有差异.
4楼2011-12-24 11:36:43
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